1,25-二羟维生素D_3对慢性哮喘小鼠气道重塑中MMP-9及NF-κB表达的影响.pdfVIP

36 · ChinJRespirCritCareMed，January2013，Vo1．12，No．1 http：／／www．circcm．coln 论 著 · 1，25一二羟维生素 D3对慢性哮喘小 鼠气道 重塑中MMP一9及 NF—KB表达的影响 宋颖芳 洪景芳 柳德灵 林庆安 叶嘉 廖云海 赖国祥 1南京军区福州总医院呼吸与危重症医学科 (福建福州 350025)；2南京军区福州总医院神经外科 (福建福州 350025) 【摘要】 目的 探讨1，25-二羟维生素D [1，25-(OH)：D，]对慢性哮喘小鼠气道重塑模型肺组 织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达及核转录因子KB(NF—KB)活化的影响。方法 BALB／c小鼠随 机分为对照组、哮喘组及VD组。卵白蛋白(OVA)致敏、激发建立慢性哮喘气道重塑模型。HE染色 及 Masson染色观察各组气道结构及上皮下纤维化，并用计算机图像分析系统评价各组气道重塑；蛋 白免疫印记法检测肺组织NF—KB065的核移位；蛋白免疫印记法和实时荧光定量PCR(RT—PCR)法检 测 IKBo~的表达水平 ；明胶酶谱法及RT—PCR法检测MMP-9的活性及mRNA表达。结果 哮喘组出 现炎性细胞浸润增多、上皮下纤维化及平滑肌细胞层增厚等气道重塑的结构改变，而 1，25．(OH)D 的干预可有效减轻上述病理改变。VD组肺组织MMP-9活性为对照组的(3．46±0．57)倍，而哮喘组 为对照组的(7．87±0．89)倍 (P0．05)；VD组MMP-9mRNA相对含量为 (3．16±0．09)，显著低于哮 喘组(5．74±0．13)(P0．05)，但仍高于对照组 (0．57±0．08)(P0．05)。1，25．(OH)D 显著抑制 哮喘肺组织中NF—KB065的核移位并上调IKBc~的表达。结论 1，25一(OH)，D 能抑制哮喘肺组织中 NF—KB的活化并减少MMP一9表达，进而干预慢性哮喘气道重塑过程。 【关键词】 哮喘；气道重塑； 1，25．二羟维生素D ；基质金属蛋白酶9； 核转录因子KB Effectsof1，25-(oH)2D3onMMP-9ExpressionandNF-KBActivityinAMurineModelofChronic Asthma SONGYing-fang ，HONGring-fang，LIUDe—ling，LINQing—an，YEJia，LIAOYun—hai，LA，Guo— xiang．DepartmentofPulmonaryandCriticalCareMedicine，FuzhouGeneralHospitalofNanjingMilitary Command．Fuzhou，Fujian，350025，China Correspond ingAuthor： ，Guo—xiang，E—mail：laiguoxiang2007@ 163．con A【bstract】 Objective Toinvestigatetheeffectsof1，25-(OH)2D3ontheexpressionofmatrix metalloprotease-9(MMP-9)andnuclearfactorKB (NF-KB)activityinamurinemodelofchronicasthma． Methods BALB／c miceweresensitized and challenged with ovalbumin toestablish chronic asthmatic mode1．Theanimalswererandomlydividedinto acontrolgroup，an asthma group and aVD group．Lung sectionsfrom themicewerestainedbyHE andMasson’strichrome，respectively．Morphometricanalysisof thestainedsectionswas performedusingcomputerizedimageanalysissystem．NucleartranslocationofNF-KB p65wasexaminedusingWesternblot．Thelevelo