3对甲苯基52磺酸基苯偶氮若丹宁与蛋白质相互作用的共振瑞利散射研究.pdfVIP

第28卷，第lo期 光谱学与光谱分析 20O8年1O月 and ()ctober。2008 SpectroscopySpectral／halysis 3一对甲苯基一5一(27一磺酸基苯偶氮)若丹宁与 蛋白质相互作用的共振瑞利散射研究 张丽娜，葛慎光。，于京华，朱元娜 济南大学化学化工学院，山东济南250022 摘要研究了3一对甲苯基一5一(27一磺酸基苯偶氮)若丹宁(4MRASP)一牛血清白蛋白(BSA)体系的共振瑞利 散射光谱，在pH 微弱。当两者形成复合物时能使RRs信号急剧增强，在380～400肿范围内呈现较高的散射强度，其最大 散射波长为391 g ·mL～，该方法用于奶粉中牛血清白蛋白的测定，结果令人满意，并对散射增强的原因进行了解释。 关键词共振瑞利散射；3一对甲苯基一5一(2’一磺酸基苯偶氮)若丹宁；牛血清白蛋白 中图分类号：0644．1文献标识码：A 文章编号：1000_0593(2008)lo_0507一02 哪 3一对甲苯基-5一(2，_磺酸基苯偶氮)若丹宁(4MRASP)是 伽 一种以若丹宁为母体结构的偶氮类化合物，由于磺酸基有较 强的酸性，使这些染料分子在酸性至弱酸性介质中也能因磺 咖 酸基的离解以阴离子状态存在，与蛋白质之间可借静电引力 自鼋_III 伽 和疏水作用力而结合成复合物。建立了一种测定蛋白质的高 籼 灵敏l氓S新方法，并对实际样品进行了分析测定，结果满 意，并对散射增强的原因进行了解释。 瑚 取1．OmL2．O×10_5 In01．L1的4MRASP溶液于10 340 36‘)：瑁O400 420 440 n1L具塞比色管中，依次加入牛血清白蛋白标准溶液1．o Wavelengthmm mL mL，pH2．84的I}R缓冲溶液2．onlL，SDS微乳液o．2 F镑lsI埒ct咖ofn∞啦In∞隋yleiglIIi咖ts∞tteril瞎 稀释近刻度。在荧光光度计上，于391r吼(Slit一5．O／2．5)处1：BsA；2：4~妇王ASP；3l 分别测量试剂空白溶液的散射光强度b和反应后溶液的散 射光强度，l，并计算共振光强度生成值△J=J，一矗。 ·mL一1)+SDSI 绘制不同组成的RRS光谱图(见图1)。由图1可见， 2．ornL rnol pH2．8＆R缓冲溶液控制体系酸度，当2×10_5 BsA和4MRAsP本身的散射光强度均很弱，在加入sDS的 ·L-1 酸性条件下，共振光强度大大增加，在酸性介质中氨基酸残 4MRAsP用量在o．8～1．2nlL时，体系的RRS强度 mL 较大且信号稳定，实验选择1．o 2×10喵rn01．L_1的 基高度质子化，其与带负电荷的4MRASP通过静电作用，使 4^低ASP聚集在蛋白质分子表面，