2018版高考生物总复习专题10生物技术实践第32讲酶的应用.docVIP

第32讲 酶的应用 （时间：30分钟） 1.（2015·浙江高考）某工厂为了生产耐高温植酸酶饲料添加剂，开展了产该酶菌株的筛选、酶的固定化及其特性分析研究，其流程如下图所示。请回答下列问题。 ―→―→―→―→―→ （1）土壤悬液首先经80 ℃处理15 min，其目的是筛选出　　　　。 （2）在无菌条件下，将经过处理的土壤悬液进行　　　　，然后涂布于含有植酸钠的固体培养基上。培养后观察到　　　　，其周围出现透明水解圈，圈的直径大小与　　　　强弱相关。 （3）筛选获得的菌株经鉴定后，将优良菌株进行液体扩大培养。培养时需要振荡，其主要目____________________________________________________。 液体培养基与固体培养基相比，不含有的成分是　　　　。 （4）在合适条件下，将提纯的植酸酶与海藻酸钠混合后，滴加到一定浓度的钙离子溶液中，使液滴形成凝胶固体小球。该过程是对酶进行　　　　。 A.吸附 B.包埋 C.装 D.洗涤 （5）温度与植酸酶相对酶活性的关系如图所示。下列叙述错误的是　　　　。 A.测试温度中，固定化与非固定化植酸酶的最适温度分别为60 ℃和45 ℃ B.测试温度范围内，固定化植酸酶的相对酶活性波动低于非固定化植酸酶 C.固定化与非固定化植酸酶相比，相对酶活性在80%以上时的温度范围较宽 D.65 ℃时固定化与非固定化植酸酶的相对酶活性因蛋白质变性而位于最低点 解析　（1）土壤悬液首先经80 ℃处理15分钟，目的是使大多数的不耐高温的微生物死亡而筛选出耐高温菌株。（2）土壤悬液在无菌条件下进行梯度稀释，使用稀释涂布平板法接种涂布于含有植酸钠的固体培养基上，经培养后可以观察到单菌落的出现，且出现透明圈，透明圈的直径大小与植酸酶的活性强弱相关。（3）振荡培养的目的是向培养液供氧，同时使微生物与培养液充分接触，有利于微生物的繁殖与生长。液体培养基与固体培养基的区别是液体培养基不含凝固剂琼脂。（4）固定化酶和固定化细胞的方法主要有包埋法、物理吸附法和化学结合法。题干所述方B。（5）根据题意，植酸酶属于耐高温酶，65 ℃时固定化与非固定化植酸酶的相对酶活性不是因蛋白质变性而位于最低点，D错误。故选：D 答案　（1）耐高温菌株（2）稀释　单菌落　植酸酶的活性 （3）供氧　琼脂（4）B（5）D 2.（2016·浙大附中全真模拟）下列是有关固定化酶及细 （1）固定化酶是将水溶性的酶用物理或　　　　的方法固定在某种介质上，使之成为　　　　而又有酶活性的制剂。可用　　　　法将α－淀粉酶固定在石英砂上形成固定化酶柱。 （2）为获取土壤中的芽胞杆菌，某同学进行了相关实验，操作流程如下。 上图中步骤A为　　　　，步骤B为　　　　。要判断培养基灭菌是_____________________________________________________ _________________________________________________________________。 （3）下列消毒灭菌方法中，常用于接种环灭菌的是　　　　。 A.70%酒精浸泡 B.紫外线照射 C.灼烧 D.高压蒸汽 （4）请分析划线分离法能得到单__________________________ ___________________________________________________________________。 答案　（1）化学　不溶于水　吸附　（2）制平板　培养　将灭菌后的培养基培养一段时间后观察是否出现菌落　（3）C　（4）划线过程中接种环上的菌液逐渐减少，到划线最后部分细菌间距离加 3.（2016·浙江省六校联考）下图是利用土壤中L微生物提取脲酶，并纯化和固定化的实验流程 ―→―→―→ （1）筛选微生物L时，用　　　　作为培养基中的唯一氮源，加入　　　　凝固剂。　　　　方法。 （2）下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是　　　　灭菌。 A.高压蒸汽 B.紫外灯照射 C.70%的酒精浸泡液 D.过滤 （3）对微生物L进行扩大培养时宜采用　　　　培养基，并采用　　　　方法对接种环进行灭菌。 （4）脲酶宜采用共价偶联法进行固定化，可通过检测固定化脲酶的　　　　确定其应用价值。除此法外，酶的固定　　　　、　　　　及交联法等。 答案　（1）尿素　琼脂糖　涂布分离法 （2）D （3）液体　灼烧 （4）活性　包埋法　吸附法 4.运用所学知识回答下列与生物技术实践相关的问题： （1）微生物培养中的无菌技术主要包括　　　　。 （2）如图为倒平板操作过程，操作时要待培养基　　　　　　　　　　　　时，在　　　　附近进行。制备固体培养基时，要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要目的是_______