一类微小昆虫—榕小蜂总DNA的提取方法.pdfVIP

噗微小昆虫一榕小蜂总DNA的提取方法 徐磊”杨大荣1 r中国科学院西双版纳热带植物园，昆明．650223；2中国科学院研究生院，北京·t00049) 摘要：榕树一榕小蜂共生系统的分子系统学研究在国内才刚刚起步，而椿小蜂个f#镄小，从 单只小蜂提取高质鼍的总DNA用普通昆虫DNA提取方法较难成功。在此．根据具体实验 过程中的问题，政进常用昆虫DNA提取方法，介绍一个简单易操作的可以从新鲜或酒精保 存的微小昆虫提取高质量总DNA的方法．同时该方法也可用于其他微小昆虫类群- 关键诃：{}}小蜂；微小昆虫：DNA提取 AnimprovedmethodforextractinggcnomicDNAof Tlli面Inmfigwasp XULei”YANGm．Ron91 Abstract：Themolecular phylogeneticanalysisoffigfig to totalDNA is itisdifficultobtain minimal，so bJgll yearsFig quality fiom锄gk wasp extraction Here．weintro“ceda andmaneuverable individualcomon using protocol simple oil thecolaⅡrflon basedthe problemsduringexpenmental method．improvedprotocol process,to to忸I from freshfemale ot malcoh01．This obtain DNA good single figwaspm瞄preserved be methodalsocan usedtootherminimalinsect species Keywords：figwasp；minimalinsect；DNAextraction 在分子生物学研究中，基因组DNA的应用十分广泛t提取方法主要包括两大类：盐析 提取法和有机溶剂提取法。近年来．随着昆虫分子系统学和进化研究的迅猛发展，以及对昆 虫分子系统发育研究中常用分子标记(如线牲体DNA和核糖件DNA)序列的快速有趣测定， 昆虫基因组DNA的成功提取成为昆虫分子系统发育研究的前提件}美花等，2002)。 榕小蜂是在榕树隐头果内繁殖的一类微小膜翅目昆虫，其个体大小一般为l-3mm，少 数种类可达3-4ram(BcrgandWiebes，1992；BergandComer,2005；如图1)．早期对椿小蜂进 行的分子系统发育学研究，是从l-lO只个体中提取总DNA(Herrcelol，1996；Idaehadoetal， and 1996；Weiblen2001)，但J亓来有研究笈现在榕小蜂中存在隐形种(JamesRasplus，2003)． 因此，为了保证总DNA的质量纯度必须从单只小蜂提取。但对于这样微小的昆虫使用常规 的提取方法，根难获得高质量的总DNA。本文根据传统小型昆虫总DNA提取方法，在细 节上做了改进．改进的方法可以从酒精保存的单头微小榕树传粉榕小蜂提取高质量DNA。 艮 热