2016届二轮复习 克隆技术 讲义.docVIP

第1讲基因工程与克隆技术(基础自修课) 考点二 克隆技术 5．马铃薯是种植广泛的农作物，病毒侵染后导致产量大幅下降，培育脱毒的马铃薯品种是提高产量的有效方法。请分析并回答： (1)马铃薯茎尖病毒极少甚至无病毒，因此可将马铃薯茎尖接种在培养基中，经过人工培养获得脱毒苗。培养基中添加________________________(填激素名称)，诱导离体细胞经过________和________完成组织培养过程，从而形成脱毒苗。为监控脱毒苗的质量，可采用________________的方法检测病毒的蛋白质。 (2)研究人员研究了茎尖外植体大小对幼苗的成苗率和脱毒率的影响，实验结果如下图。 实验结果表明，茎尖越小，________________________，因此马铃薯脱毒培养中茎尖外植体的适宜大小为________mm。 解析：(1)离体的植物组织必须在植物激素的作用下才能经脱分化形成愈伤组织，然后经再分化形成具有根、茎、叶的植物体。检测病毒的蛋白质要用抗原—抗体杂交法。(2)据图可知，茎尖越小，脱毒率越高，成苗率越低，当茎尖大小为0.27 mm时脱毒率和成苗率相对都较高。 答案：(1)生长素和细胞分裂素　脱分化　再分化 抗原—抗体杂交　(2)脱毒率越高，成苗率越低　0.27 6．科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄—马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如下图所示： (1)植物体细胞杂交依据的生物学原理有______________________________________。 (2)过程①常用的酶是__________________，细胞融合完成的标志是________________。 (3)植物原生质体融合过程常利用化学试剂________诱导融合，在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察，根据细胞膜表面荧光的不同可观察到________种不同的原生质体，当观察到__________________________________时可判断该原生质体是由番茄和马铃薯融合而成的。 (4)过程③和过程④依次为________________，过程④中的培养基常添加的植物激素是____________________。 (5)若番茄细胞内含m条染色体，马铃薯细胞中含n条染色体，则“番茄—马铃薯”细胞在有丝分裂后期含________条染色体。若杂种细胞培育成的“番茄—马铃薯”植株为四倍体，则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于________植株。 解析：(1)植物体细胞杂交包括原生质体融合和培育杂种植株两大步骤，两者的原理分别是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。(2)去除细胞壁常用的酶是纤维素酶和果胶酶，细胞融合完成的标志是形成新的细胞壁。(3)化学促融剂是聚乙二醇，两两融合的原生质体有三种：番茄—番茄、番茄—马铃薯、马铃薯—马铃薯，其中杂种细胞的细胞表面有两种颜色的荧光。(4)过程③和过程④分别表示脱分化和再分化，诱导细胞分化所用的植物激素主要是生长素和细胞分裂素。(5)“番茄—马铃薯”体细胞有m＋n条染色体，有丝分裂后期染色体数目加倍，由配子发育成的个体均为单倍体。 答案：(1)细胞膜的流动性、植物细胞的全能性　(2)纤维素酶和果胶酶　形成了新的细胞壁　(3)聚乙二醇(或PEG)　3　融合的细胞表面既有红色荧光又有绿色荧光 (4)脱分化和再分化　生长素和细胞分裂素 (5)2(m＋n)　单倍体 7．右图所示为动物细胞培养过程中，动物细胞增殖情况的变化曲线(图中B、D两点表示经筛选后继续培养)，请据图回答下面的问题： (1)OA段的培养称为________培养，AB段可能发生了____________现象，需要用________酶处理，以使组织细胞分散开来。 (2)动物细胞培养和植物组织培养过程中，就细胞增殖、分化来说，动植物细胞都要进行____________，不同的是植物细胞还要进行______________________________。 (3)为制备单克隆抗体，需将________注射到小鼠体内，以此获取________细胞，同时可选取图中________点的细胞与该细胞融合形成杂交细胞，所选取细胞的细胞膜上的________比正常细胞显著减少。为筛选出能够产生单克隆抗体的杂交细胞，可用________培养基达到目的。 解析：据图中不同阶段细胞的增殖代数可知，AB段细胞不再增殖，但此时细胞仍有增殖能力，所以此时可能发生了接触抑制，故OA段为原代培养；D点细胞增殖代数达到了60次以上，故此时细胞发生了癌变，获得了无限增殖的能力。 答案：(1)原代　接触抑制　胰蛋白　(2)增殖(或分裂)　脱