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笔筒草有效组分抗2型糖尿病作用机制研究 　　[摘要]目的研究笔筒草有效组分对2型糖尿病大鼠抗氧化作用、胰岛素抵抗的影响。方法通过腹腔注射链佐霉素联合高脂饲料喂养制备2型糖尿病大鼠模型，观察其对大鼠空腹血糖（FPG）、空腹胰岛素（FINS）、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、血清超氧化物歧化酶（sOD）活性、丙二醛（MDA）、及葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）的影响。结果与模型组比较，笔筒草乙醇组分及乙酸乙酯组分均可显著降低糖尿病大鼠FPG、FINS及HOMA-IR，明显升高骨骼肌GLUT4表达水平，与模型组相比，差异有统计学意义（P0.05）；与乙酸乙酯组分不同之处在于，乙醇组分还能升高SOD及降低MDA含量，差异有统计学意义（P0.05）。结论笔筒草乙醇及乙酸乙酯组分降血糖机制可能与改善机体对胰岛素的敏感性，调控骨骼肌GLUT4表达水平，维持胰岛细胞的正常结构和功能密切相关，其中笔筒草乙醇组分还具有清除自由基和提高机体抗氧化能力等作用。 　　[关键词]笔筒草；有效组分；抗2型糖尿病；大鼠 　　2型糖尿病是最常见的慢性病之一。近年来，随着社会的发展和人民生活水平的提高，人类的疾病谱发生显著变化，正由传染性疾病逐步过渡到慢性非传染性疾病，根据WHO公布的数据显示，糖尿病的患病人数在逐渐增加，其已经成为继肿瘤、心脑血管疾病后威胁人类健康和生命安全的第三位重大疾病。2型糖尿病患病率近50年来增加迅速，估计我国患病人数已接近2千万。笔筒草，别名节节草、接骨草、锁眉草。为木贼科木贼属植物笔筒草的全草，生于潮湿路旁、砂地、荒原、溪边，在广西资源丰富。笔筒草性微寒，味甘、苦，具有祛风清热除湿等功效。笔筒草具有降血糖作用，课题组前期基础研究发现，笔筒草乙醇提取组分和乙酸乙酯组分均能降低2型糖尿大鼠血糖水平。本研究在前期基础之上，采用SMZ腹腔注射及高脂肪饲料造成大鼠2型糖尿模型，观察笔筒草对胰岛素抵抗作用及抗氧化作用的影响，为广西研发抗糖尿病新药提供科学实验依据，为临床使用笔筒草治疗2型糖尿病作用机制研究提供参考。 　　1材料与方法 　　1.1动物 　　SD大鼠70只，雌雄各半，SPF级，体质量（200±20）g，由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供，生产许可证号：SCXK（湘）2011-0003。 　　1.2药物及试剂 　　笔筒草醇提取物，笔筒草乙酸乙酯提取物制备方法：笔筒草提取物的制备：（1）取适量笔筒草粗粉，加入10倍量纯净水浸渍1h，加热沸腾1h，重复提取2次，合并浓缩，得水提浸膏。（2）取适量笔筒草粗粉，分别加入10倍量50%乙醇，反复回流提取、浓缩、过滤直至滤液澄清，合并滤液浓缩，得50%乙醇浸膏。（3）取适量笔筒草粗粉，加入10倍量70%乙醇，反复回流提取，合并滤液浓缩，得浸膏，硅胶拌样，乙酸乙酯提取，得乙酸乙酯提取物。浓缩至2.5g/mL，置于4℃恒温冰箱备用。二甲双胍片（常州制药厂有限公司，批号；链脲佐菌素（streptozotocin，STZ，美国Sigma公司）；超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）试剂盒、丙二醛（malonaldehvde，MDA）试剂盒（南京建成生物工程研究所）；胰岛素试剂盒（瑞典Mercodia公司）；转运蛋白4（GLUT4）ELISA试剂盒，（上海高创化学科技有限公司）。 　　1.3造模方法 　　分组及给药取SD大鼠70只，适应性喂养5d，选取8只作为空白组喂养一般饲料，其余喂养高糖高脂饲料，分别腹腔注射STZ35mg/kg，2周后选取模型复制成功大鼠（空腹血糖值高于血糖≥16.7mmol/L）共56只并随机分为7组：空白组，模型组，二甲双胍组（0.2g/kg），笔筒草乙醇低（ERAL，5 g/kg）、高剂量组（ERAH，10g/kg），笔筒草乙酸乙酯低（EREL，5g，kg）、高剂量组（EREH，10g/kg），每组8只。连续给药4周。 　　大鼠空腹血糖（FPG）、大鼠空腹胰岛素（FINS）和胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）测定：末次给药后，腹主动脉取血，3000r/min，10min分离血清，-20℃保存。按试剂盒说明，检测各组大鼠FPG、FINS含量，计算胰岛素抵抗指数：HOMA-IR=空腹血糖x空腹胰岛素/22.5。 　　骨骼肌组织GLUT-4的含量测定：给药4周，末次给药后处死，快速提取大鼠左后肢的大腿骨骼肌组织，进行组织匀浆，5000r/min离心5min后，取上清液，按照葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）ELISA试剂盒进行检测。 　　1.4统计学处理 　　所有数据用SPSS19.0软件进行统计学处理，计量资料以（x±s）表示，采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析及q检验，P0.05为差异有统计学意义