提高谱图检索匹配的基本方法.doc

提高谱图检索匹配的基本方法 高分辨GC/MS技术已经广泛应用于各个领域。毛细管色谱具有高的分离效率和灵敏度，因而逐渐成为GC/MS连用的主要分离手段。国内大部份仪器属于HRGC/LRMS的连用，这意味着将依靠谱库检索的办法来推测色谱峰的归属。众所周知，谱库检索对于异构体来说常常难以奏效，因此，人们辅以二种方法来帮助确定被分析组分的结构。一是用已知标准样品作保留时间的比对，这是为各国所公认的最有效方法。不足之处是这些标准化合物不一定都能找到;另一方法是利用文献报道的数据，即利用常备的标准毛细管柱(如SE54石英熔融毛细管交链柱)，在与文献相接近的实验条件下确定各异构体的相对位置。必要时可以加入用作保留时间指示的内标化合物。 无论如何，首要的间题是使获得的质谱图尽可能消除或减少各种人为影响谱图变形的因素，如仪器的正确调谐以保持高低质量峰的正确比值;保持足够的色谱峰强度;设置合适的汽化够、柱温、传输线温度以及离子源温度。对于前三种温度的设定主要考虑减少样品的热解。一般认为在电子电离的条件下有机化合物蒸汽分子在电离前约与电离室器壁碰撞50次左右。因此，过高的离子源温度会影响分子离子峰的丰度，尤其是对脂肪族化合物。Spiteller ME3曾试验过正三十烷的温度效应.在340 0C源温时，分子离子峰为基峰(m/z 57)的100，而当温度为70℃时则达到8600。可计算出340℃时分子离子的内能增加3 eV，因而导致分子离子进一步裂解的强烈倾向。其次选择正确的程序升温速率，尽可能使混合物体系能得到比较完善的分离。注意这些因素就可以确保色谱峰在没有其它组份干扰的情况下，获得与标准谱图相比拟的质谱图，有利于在检索中获得高的匹配率。 尽管如此，在一个复杂体系的GC/MS分析中不可避免会出现峰间干扰，乃至重叠。这是因为通常在60分钟的毛细管GC分析时间内以10秒的峰宽计算，理论上可以允许有良好分辨的色谱峰360个。对于并不很复杂的体系来说，这样的分离能力足以将被分析物一一分离，并通过本底扣除获得良好的质谱图，供谱库检索用。但是有不少领域中往往 遇到的是一个很复杂的体系(例如石油产品，煤焦油馏份，环境污染物，香料物质等)，这些被分析的混合物中少则含有100多个成份，多则达数百个，且不是均匀分布在总离子流图 上.这是导致峰不被完全分离的一个原因;另一原因是许多难以分离的化合物主要集中在异构体上(包括位置异构，几何异构，立体异构，光学异构等)，它们之间往往由于结构上的极其相似而在保留时间上很接近;第三个原因是有机化合物如此之多，即使从30℃至.400C，以每分钟1℃的升温速率，最多容纳200。左右的窗口，显然会有许多化合物的保留时间是落在同一窗口内。最后，色谱柱的柱效降低也是一个常见的因素. 本文主要讨论如何从相互有干扰的色谱峰中通过合理的处理来获得高匹配率的检索 结果，提高谱库检索的命中率。本文使用的仪器为PE QMass910 GC/MS，以煤炼焦过程中获得的粗苯(180℃以下的馏出组份)为例，该样品出峰的保留时间跨度为60分钟，约有170个色谱峰，现挑选一些典型的峰加以说明. 1常规的本底扣除是取样品峰的任何一侧，条件是峰的二侧无明显的千扰峰。取图1中A峰的最高处获质谱图(图2)。用该图进行检索，得不到合适的匹配结果(相似率低于3000)。如果仅扣除右边的本底值，该图几乎与图2一致。分析命中率低的原因是来自m/!84峰的干扰.这一化合物质谱图是典型的烃类，而如此明显的m/z 84峰却喻示了氧元素的存在.现按图1中A峰的右左二边扣除本底则获得图3。用该质谱进行检索，从9个候选化合物中倾向于正庚烷。用已知正庚烷测定其保留时间，证明是正确的。相似率达96%(见图妇。由此可见，m/z 84是干扰峰.A峰左边的大峰为苯，m/z 84峰来自主峰与A峰之间的区域。 2图5中峰1和2属于部分迭加的二个组份。对1号峰，取它的左半部几个谱图号累加， 然后扣除左边的本底，即可获得图6.检索结果为辛烯(相似率为93写).对2号峰取它右半部的几个谱图号象加，然后扣除右边的本底，即可获得图7.检索结果为二甲基环已烷2的处理比较困难，二峰重叠比较大，峰1的干扰比较严重，见图18。以m/a 132的峰高作为扣除本底好坏的标准，如仅扣除峰2左边的本底，均未获得满意的结果，相似率低于%最后再用适当扣除峰1的贡献的方法，才得到改善的结果(见图19)，检索后相似率达81%以上。5图15中的D峰从外观上看像一个组份的色谱峰，实际上其质谱图(见图20)明显是一个混合物谱图。按照谱图解析来看，估计是三个成份(即m/z 108,117,120分别属于三个化合物的分子峰)的重叠结果。按照谱图解析和保留时间值确定分子峰为108，是邻