抗瓜氨酸化肽特异性免疫复合物对类风湿关节滑膜细胞功能影响的研究.pdf

高德玉等 抗瓜氨酸化肽特异性免疫复合物对类风湿关节滑膜细胞功能影响的研究 璺 朔 115 · doi：10．3969／j．issn．1000-484X．2013．02．001 · 基础免疫学 · 抗瓜氨酸化肽特异性免疫复合物对类风湿关节滑膜细胞功能影响的 研 究 高德玉 陈芳芳② 刘 阳 王 凯 虞 伟 严孝岭 李晓军 (南京军区南京总医院临床 中心实验科，南京210002) 中国图书分类号 R392．12 文献标识码 A 文章编号 1000-484X(2013)02-0115-06 [摘 要] 目的：研究类风湿关节炎(RA)患者血清抗瓜氨酸化肽特异性免疫复合物(ACPA．IC)对 RA患者关节成纤维样 滑膜细胞 (FLS)增殖和分泌细胞因子功能的影响。方法：用PEG沉淀法提取RA患者血清免疫复合物 (Ic)，ELISA法检测 Ic中 ACPA—IC水平。用 G蛋白免疫亲和层析法从6份ACPA．IC(+)RA血清、4份ACPA—IC(一)RA血清及 10份正常人血清中提取 Ic。体外培养RA关节FLS；分别用RAACPA—IC(+)提取物、ACPA．IC(一)提取物及健康人血清 Ic(C．IC)刺激FLS，用CCK．8 (CellCountingKit-8)试剂检测FLS增殖隋况，液态芯片技术检测不同来源Ic刺激对FLS分泌 IL．1B、1L-2、IL-6、IL一8、IL—lO、IL一 15、IL．17、TNF一、GM—CSF、EGF、VEGF等 11种细胞因子水平的影响。结果：RA患者ACPA—IC(+)提取物能够显著促进FLS增 殖，与对照组Ic比较，在培养24小时时间里，四种浓度(25、5O、75和 100 g／m1)的ACPA—IC都能显著促进FLS增殖。RA患者 血清ACPA—IC(+)和ACPA—IC(一)提取物刺激 FLS24小时后，可诱导细胞分泌大量 IL-6、IL．8和GM—CSF；其中ACPA．IC(+)组 刺激FLS分泌GM—CSF和 IL．8量均显著高于ACPA．IC(一)组和c．Ic组，ACPA．IC(+)组刺激FLS分泌IL-6水平显著高于c—Ic 组，但与ACPA．IC(一)组无显著性差异。三组间刺激分泌 IL—lB、IL一2、IL一10、IL一15、IL一17、TNF．、EGF、VEGF等其他8种细胞因 子含量均无显著性差异。结论：RA患者血清ACPA—IC可促进FLS增殖，并诱导其分泌 IL-6、IL一8和GM—CSF等炎性细胞因子，进 而进一步诱发滑膜炎症反应及骨质破坏。 [关键词] 类风湿关节炎(RA)；抗环瓜氨酸肽自身抗体 (ACPA)；免疫复合物(Ic)；细胞因子 ；细胞增殖 Theeffectsofanti-citrullinatedpeptideantibodyspecificimmunecomplexeson thefunctionsoffibroblast．1ikesynoviocyteinrheumatoidarthritis GAODe—Yu，CHENFang—Fang ，LIUYang，WANGKai，YUWei，YANXiao—Ling，LIXiao-Jun．InstituteofClinical Laboratory，NanjingGeneralHospitalofNanjingMilitaryCommand，PLA，Nanjing210002，China [Abstract] Objective：Tostudytheeffectsofanti—citrullinatedpeptideantibody(ACPA)specificimmunecomplexes(ACPA— IC)fromrheumatoida~hfitis(RA)patientsseraonthefunctionsoffibroblast—likesynoviocyte．Methods：TheselumICrfomRApa— tientsandheNthycontrolswereisolatedbypolyethyleneglycol(PEG)precipitation．ThelevelsofACPA—ICintheICweredetermined byELISA．fibroblast—likesynovioeytes(FLSs)fromRApatientswerecultivatedinvitroandwerestimulatedwithACPA-ICpositive