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抗生素FR008发酵生产工艺初步研究.pdf
覆建疑n’ 第三届海洋生物高技术论坛 200s.08。19.23
抗生素FR.008发酵生产工艺初步研究
毛相朝‘杨亮沈亚领 魏东芝
(生物反应器工程国家重点实验室,华东理工大学生物化学研究所,上海200237)
摘要:本丈以链霉菌FR.008为出发菌株,研究了摇瓶发酵过程温度、氮源及其浓度对发酵
产物的影响,初步确定最适温度控制方式和最适氮源;同时探索了抗生素FR-008的提取工
艺,为抗生素产业化及其衍生物的研究奠定了基础。
关键词:链霉菌FR一008温度氮源提取工艺
FR一008是由链霉菌FR一008发酵得到f由次级代谢产物,初步的化学结构验证表明它属_j二
‘种类似’J:杀假丝菌素的抗生素,有很强的抗真菌作用,主要用‘rJ:深部真菌病和外部真菌感
含有相例的化合物,他们I司属J:七烯大环内酯类抗生素【4】,能够作用二J:真核细胞膜,从而导
f由培养条件进行了{|:u步研究,,j:初步建
敛真核绌胞的死亡瓯6|。本文对摇瓶中链霉菌Fr一008
立了提取了提取纯化丁艺。
l材料与方法
1.1材料
1.1.1菌种:链霉菌FR.008,上海交通大学BIO.X生命科学研究中心提供
1.1.2培养基
7.5
孢子培养基:2%琼脂粉,2%甘露醇,2%黄豆饼粉,pH
7.5
种子培养基:酵母粉0.3%,蛋白胨0.5%,麦芽糖提取粉0.3%,葡萄糖1%,pH
1.2方法
m1
1.2.1种子培养:从长有FR一008的平板上挑取少景孢子,接种jj二装有50
种子培养基的250ml三角瓶中,28。C摇床,200rpm,培养32小时。
】.2.2摇瓶发酵培养‘31:以10%接种最接种子液j:不同配办的发酵培养基中,
28。C摇屎,200
rpm,培养96小时。
l。2.3产物f门含景检测‘”:高效液棚色潜法,SB.C8(4.6mmx250mm)色谱柱,乙
腈.20 ml/min,柱温
mM醋酸铵缓冲液(pH4.0)=40:60为流动相,流速为1.0
为25℃,检测波长380nm。
通讯作者:02I
E-mail:ylshen@ecust.edu.cn
02IE.mail:dzhiwei@ecust.edu.cn
4lI
疆建In 第三届海洋生物高技术论坛 2005.08.19-23
2结果与讨论
2.1发酵温度的选择
由jJ:大多数抗生素产生菌在生长过程中分为菌体生长期和次级代谢产物合成期,而两个
阶段的控制条件往往不同,其中温度室一个重要影响阗素,宴秋鸿等发现分阶段控温策略对
梅0呤霉素生产有较大影响隅】。本文作者考察了以下四种变温情况对FR一008发酵单位的影响,
产景比较高。
2.2氮源的选择
本研究以l%葡萄糖和O.3%MaltExtract作为固定碳源,氮源分别使用玉米浆(10%,15%,
发酵的影响,结果见表l。
从表1可以看出,不同的氮源对J二抗生素发酵生产影响很大,即使同一氮源,
温度对FR-008发酵单位的影响
■ …圈
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