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甲苯降解高效菌的分离及其甲苯降解特性比较研究 席劲瑛，胡洪营，朱洪博，钱易 清华大学环境科学与工程系环境模拟与污染控制国家重点实验室北京100084 摘要 本论文筛选得到2株甲苯降解高效菌，并利用本研究开发的VOCs生物降解实验方 法，即玻璃龙头塞三角瓶实验法，对菌种的甲苯降解特性进行了较系统的研究。结果表明， ’2株细菌在纯种培养和以甲苯为单一碳源的条件下，对甲苯的降解均符合Monod模型；在pH为6．8、 温度为28—37℃、营养盐充足的条件下，具有最佳的甲苯降解能力。比较测得的甲苯降解动力学参 数可知，2号菌的甲苯降解性能略优于1号菌，其最大比增殖速率、最大比基质降解速率和细胞产 率系数分别为0．1 8h一，O．469甲苯，(g细菌．h)和0．39g细胞儋甲苯。 关键词：甲苯降解高效菌，VOCs，降解特性 恶臭(Odor)与挥发性有机物(Volatile Organic 物处理技术的原理是：微生物通过代谢作用，将污染物转化成为小分子的C02、水和无 机盐。它具有工艺简单、能耗低和较少产生二次污染的优点，目前该技术已成为一种倍 受关注的恶臭与VOCs污染控制技术【l】。 生物过滤塔是最早应用的废气生物处理技术之一【21，微生物附着在多孔载体表面形 成具有较大比表面积的活性填料层，恶臭或VOCs气体经过滤塔的填料层，污染物由气 相转移到填料层中被微生物利用。生物过滤塔的污染物去除能力主要取决于填料中降解 微生物的数量和活性。选择合适的菌种对过滤塔进行接种和生物强化，可以提高过滤 塔对难降解污染物的去除能力、缩短启动周期和提高其抗击冲击负荷的能力【3，41。用 于接种和生物强化的菌种可以是纯种微生物，也可以是多种微生物组成的复合菌 种。在使用菌种前，应当对菌种的污染物降解能力、影响降解的因素及菌种对环 境的适应能力进行考察和评价。在摇瓶中进行污染物降解的间歇实验是研究菌种 降解污染物特性的一种常用方法【5】。 本论文从处理甲苯气体的生物过滤塔中分离得到2株甲苯降解高效菌，并对其甲苯 降解特性进行了较系统的比较研究。 1实验方法 1．1甲苯降解高效菌的筛选 菌种来源于一处理甲苯气体的生物过滤塔实验装置，取其填料加入O．9％生理盐水 白胨琼脂培养基对其中的细菌进行划线分离，对得到的单菌落进行多次分离并通过革兰 氏染色和显微观察判断是否为纯菌株。 将分离得到的纯菌接种至含有BS培养基(不含有机碳源)【钟和甲苯(浓度小于 100mg／L)的比色管中进行密闭培养。根据细菌的生长状况(液体培养基是否混浊或出 现菌体)以及密闭体系中气相甲苯浓度的变化初步筛选出甲苯降解菌。 1．2 VOCs生物降解实验 1．2．1 VOCs生物降解实验系统的设计与可靠性研究 目前，在一些考察难降解VOCs生物降解过程的摇瓶实验中【7·81，对目标污染 物测定和分析的重点多集中在水溶液，对于VOCs的挥发性和吸附特性没有引起 足够重视。这在VOCs浓度较低而挥发性较强时可能会引起较大的误差，从而影 响实验结果的可信度。本研究参考有关方法【5·61，在甲苯降解实验中利用密闭体系 下甲苯的气液相平衡成功地监测了甲苯的生物降解过程。实验装置与原理如图1 所示。在一个密闭、高速振荡的摇瓶中，假设气液相甲苯在降解实验过程中始终处于平 衡状态， 即 Co=H·CL (1) 可以通过气相甲苯浓度变化么CG计算体系中甲苯总量的变化AX。0l，即 么Xt01=／1Co·VG+／1CL·VL=／1Co·VG+／1CG／H·VL =／1CG·(VG+VL／H) (2) 其中，CG、CL、VG、VL分别为气相、液相甲苯浓度和气相、液相体积，H为亨 利系数。本研究中，甲苯在28C下水溶液中的的亨利常数取O．34(无量纲)【61。 在低浓度VOCs降解实验中，除了密闭外，还要求器壁对VOCs的吸附量较 小可以忽略。本研究通过前期实验验证了玻璃对甲苯的吸附可以忽略，并且为了满足 VOCs降解实验的需要，自行设计了如图2所示的龙头塞三角瓶，并对其可靠性进行了 菌的菌液，加入同样体积的液体甲苯，密闭反应瓶，测定瓶中气相甲苯浓度