甲烷利用菌IMV+3011生物合成聚羟基丁酸酯的研究.pdfVIP

第十一届全国青年催化会议论文集 文章编号：PD．079 301 甲烷利用菌IMV1生物合成聚羟基丁酸酯的研究· 张颖鑫a，辛嘉英，夏春谷b¨ (。中科院兰州化学物理研究所羰基合成与选择氧化国家重点实验室兰州730000；。哈尔滨商业 大学食品科学与工程省重点实验室哈尔滨150076) 关键词：PHB甲烷利用菌金属离子分子量生物合成 随着日益严重的白色污染对环境所带来的威胁，聚．3．羟基丁酸酯PHB以其生物可降解性和 生物相容性等优点作为一种新的塑料替代品以及生物医学材料，已经成为人们的研究热点。甲基 IMV J 301l可以由体内PHB合成酶等各种酶通过自身的代谢调节 弯菌(Methylosinustrichosporium 作用合成PHB，这种甲烷利用菌能利用甲烷、甲醇，在非无菌条件下胞内合成PHB，可以降低 PHB的生产成本并简化了操作，从而带来经济效益。为获得能利用低成本碳源高产PHB的菌种， 对该菌种积累PHB的能力进行了研究。 1．考察甲烷利用菌积累PHB的影响因素 甲烷利用菌可以以甲烷作为唯一碳源生长，如图所示，随细胞存在环境的变化，自身进行调 节进入不同的代谢循环，营养平衡时，进入TCA循环，正常生长；营养不平衡时，进入PHB循 环，合成PHB来供给自身能量。通常在营养平衡阶段细胞迅速生长，而PHB并不能得到大量积 累，所以通常PHB的积累分为两阶段进行，第一阶段即营养平衡阶段获得大量菌体，再转入第二 阶段即营养受限阶段进行单位细胞中PHB的大量积累。甲烷利用菌IMV301l对甲醇耐受能力提 高后，在非无菌条件下经过营养平衡的培养阶段，加入O．10／rid(v／v)的甲醇使该菌种利用甲烷可以 达到较高的生长密度(2．59／L)Ⅲ，PHB的积累量则需通过不同条件的考察对细胞自身代谢循环过程 的调节来获得提高。 cH奖cH30卜迪kH车Ho业HcooH旦C02 Serine PathwayRuMP 《 矗，o i Pathway …育c—静Acycle imbala舭d Y acyl∽ylu硼乳既酗e llacetyl-CoA htworges8refs瑚t ¨∽廿 B PH噱cycle 图1 甲烷利用菌IMV3011的代谢路径 1．1培养基中对细胞生长及单位细胞中PHB积累量的影响因素 研究表明氮源对细胞生长和PHB的积累有很大影响，当培养基中NH4+浓度较高时对细胞生 长有很大的促进作用，对PHB积累有很大的抑制作用：反之，N地+浓度较低时，则会抑制细胞 生长促进PHB积累121。 ’基金项目教育部新世纪优秀人才支持计划资助(编号：NECT-05-0358) “通讯联系人．电子邮箱cgxia@Izb．ac．cn PR--389 第十一届全国青年催化会议论支集 和氮源相同的作用．已有专利【4】报道甲烷利用菌通过调节M92+的浓度进行PHB的生产，PHB可 以达到40％的含量。另外，对于大多数甲烷利用菌来说，Fe3+离子对于MMO的活性有显著的影 响，在IMV301 也关系到细胞自身代谢过程中是否可以供给足够的NADH，为PHB的大量合成提供条件。 1．2生长期对单位细胞中的PHB积累量的影