发学生2012级《酶工程实验》教案.doc

徐 州 工 程 学 院 教 案 2014 年至 2015 年 第 1 学期 第 周 星期 课题名称（含教材章节）： 《酶工程实验》 实验一 产纤维素酶菌株筛选和产酶条件优化分析 教学目的和要求： 1、熟悉功能性菌株筛选方法 2、掌握纤维素降解菌株的筛选方法 3、掌握菌株产酶条件优化方法 教学重点： 酶工程研究开发的策略 教学难点： 产酶条件优化方法 教 学 内 容 （ 要 点 ） 1、产纤维素酶菌株的筛选分析 2、菌株产酶条件优化 徐 州 工 程 学 院 教 案 纸 一、实验目的实验原理 (1)酶的粗提； (2)酶的精制。 (九) 微生物产酶菌种的保藏 (1)斜面； (2)沙土管； (3)冷冻。 普通冷冻保藏技术(-20℃) 超低温冷冻保藏技术(-60一-80℃) 液氮冷冻保藏技术 (二)、纤维素酶研究情况 2.1 纤维素酶简介 2.1.1 纤维素 纤维素占植物干重的35%~50%，是地球上分布最广的碳水化合物。它无色、无味，呈白色丝状，不溶于水及一般的有机溶剂。纤维素分子是由葡萄糖苷通过β-1,4糖苷键连接起来的链状高分子，分子量50000~2500000，相当于300~15000个葡萄糖基，不形成螺旋构象，没有分支结构，易形成晶体。 2.1.2 纤维素酶 纤维素酶是能将纤维素水解成还原糖的一类酶系的总称。目前普遍认为要完全降解纤维素，至少需要3种功能不同的酶协同作用。它们是 EG(内切葡聚糖酶)、CBH(外切葡聚糖酶)和 CB(β-葡萄糖苷酶)。 2.2 纤维素酶的应用 2.2.1 在能源方面的应用 2.2.2 在其他方面的应用 纤维素酶已被广泛的应用于食品、酿造、农业、纺织、洗衣等多个领域中。 食品工业中利用纤维素酶处理植物性原料，可使植物细胞壁软化、崩溃，从而改变细胞壁的通透性，提高细胞内含物如蛋白质、糖等的释放与提取，便于加工。另外，在过去果实和蔬菜的加工过程中，软化植物组织的办法主要采用热烫或者酸碱处理，使得果蔬的香味和维生素大量损失，使产品的食用和营养价值下降。现在利用纤维素酶进行预处理就可以避免这些缺点。 酱油酿造主要利用蛋白酶、淀粉酶等酶类对原料进行酶解,若再使用纤维素酶, 使大豆等原料的细胞膜膨胀软化破坏, 使包藏在细胞中的蛋白质、碳水化合物释放, 这样就可以缩短酿造的时间、提高产率, 同时还提高品质, 使氨基酸还原糖含量增加。 在啤酒、葡萄酒的酿造过程中也使用到纤维素酶。在低质量大麦发芽的过程中加入纤维素酶可水解β-1,3和β-1,4葡聚糖从而帮助大麦发芽。纤维素酶还可以提高啤酒的过滤效率，并能增加葡萄酒的香味。 由于畜禽饲料中含有大量的纤维素，除某些反刍动物有分解纤维素的能力外，大部分畜禽没有此能力。纤维素酶能够分解复杂的纤维素，生成易消化物质葡萄糖，便于动物吸收。在饲料中添加了纤维素酶后，其提高家畜家禽生长性能、生产性能等效果显著。 纤维素酶已成为纺织和洗衣行业的第三大酶系。生物打磨和生物抛光是目前纤维素酶在纺织行业中的主要应用。纤维素酶也被用于家用洗涤剂中，因为它们可以增加去污能力，从织物表面去处小的碎纤维，增加织物表面的