第12章+翻译.pptVIP

肽-脯氨酰顺反异构酶 多肽链中肽酰-脯氨酸间形成的肽键有顺反两种异构体，空间构象明显差别。 肽酰-脯氨酰顺反异构酶可促进上述顺反两种异构体之间的转换。 肽酰-脯氨酰顺反异构酶是蛋白质三维构象形成的限速酶，在肽链合成需形成顺式构型时，可使多肽在各脯氨酸弯折处形成准确折叠。 三、翻译后的加工 一级结构的修饰 肽链N端的修饰 切除N端甲酰蛋氨酸或蛋氨酸 个别氨基酸的修饰 形成二硫键，赖氨酸、脯氨酸羟基化，丝氨酸、苏氨酸磷酸化，组氨酸甲基化，谷氨酸羧基化 多肽链的水解修饰 去除某些肽段或氨基酸残基 鸦片促黑皮质素原(POMC)的水解修饰 N C 信号肽 PMOC KR KR 103肽 ( ？) ACTH ?-LT ?-MSH ?-MSH Endophin 三、翻译后的加工 高级结构的修饰 亚基聚合 辅基连接 疏水脂链的共价连接 形成蛋白质的四级结构 如，血红蛋白 （四个亚基构成，分别为两个α亚基和两个β亚基 ） 蛋白质合成后的靶向输送 蛋白质合成后需要经过复杂机制，定向输送到最终发挥生物功能的细胞靶部位，这一过程称为蛋白质的靶向输送。 信号序列（signal sequence）： 所有靶向输送的蛋白质结构中存在分选信号，主要为N末端特异氨基酸序列，可引导蛋白质转移到细胞的适当靶部位，这一疏水的肽段称为信号序列 靶向输送蛋白 信号序列或成分 分泌蛋白 信号肽 内质网腔蛋白 信号肽，C端-Lys-Asp-Glu-Leu-COO-(KDEL序列) 线粒体蛋白 N端靶向序列（20～35氨基酸残基） 核蛋白 核定位序列（-Pro-Pro-Lys-Lys-Lys-Arg-Lys-Val-，SV40 T抗原） 过氧化体蛋白 -Ser-Lys-Leu-（PST序列） 溶酶体蛋白 Man-6-P（甘露糖-6-磷酸） 靶向输送蛋白的信号序列或成分 （一）分泌蛋白的靶向输送 真核细胞分泌蛋白等前体合成后靶向输送过程首先要进入内质网。 信号肽(signal peptide) 各种新生分泌蛋白的N端有保守的氨基酸序列称信号肽。 信号肽的一级结构 碱性氨基酸 （赖氨酸、精氨酸） 中性氨基酸 （亮氨酸、异亮氨酸） 极性氨基酸 （甘、丙、丝） 信号肽引导真核分泌蛋白进入内质网 （二）线粒体蛋白的靶向输送 （三）细胞核蛋白的靶向输送 蛋白质生物合成的干扰和抑制Interference Inhibition of Protein Biosynthesis 第 四 节 蛋白质生物合成是很多天然抗生素和某些毒素的作用靶点。它们就是通过阻断真核、原核生物蛋白质翻译体系某组分功能，干扰和抑制蛋白质生物合成过程而起作用的。 可针对蛋白质生物合成必需的关键组分作为研究新抗菌药物的作用靶点。同时尽量利用真核、原核生物蛋白质合成体系的任何差异，以设计、筛选仅对病原微生物特效而不损害人体的药物。 四、蛋白质生物合成与医学 四、蛋白质生物合成与医学 抗生素对蛋白质的影响 丝裂霉素、博来霉素、纺线菌素抑制DNA模板活性 利福霉素抑制RNA聚合酶活性 四环素使细菌核蛋白体小亚基变构 链霉素抑制细菌蛋白质合成起始阶段 氯霉素抑制细菌核蛋白体大亚基转肽酶活性 抗生素(antibiotics) 是微生物产生的能够杀灭或抑制细菌的一类药物。 抗代谢药物 指能干扰生物代谢过程，从而抑制细胞过度生长的药物，如：6-MP。 某些毒素也作用于基因信息传递过程。 嘌呤霉素作用示意图 四环素族 氯霉素 链霉素和卡那霉素 嘌呤霉素 放线菌酮 二、其他干扰蛋白质生物合成的物质 毒素(toxin) 干扰素(interferon) 白喉毒素(diphtheria toxin)的作用机理 ——使eEF2发生ADP糖基化 白喉毒素 + + 延长因子-2 （有活性） 延长因子-2 （无活性） 干扰素的作用机理 干扰素诱导eIF2磷酸化而失活 干扰素诱导的蛋白激酶 dsRNA ATP eIF2 ADP eIF2-P（失活） Pi 磷酸酶 2. 干扰素诱导病毒RNA降解 降解mRNA dsRNA 干扰素 A A P A P PPP 2? 5? 2? 5? 5? 2?- 5?A A PPP ATP 2-5A合成酶 RNaseL RNaseL 活化 小结： 氨基酸的活化： 20种氨基酸、20种氨基酰-tRNA合成酶、≧32种tRNA、ATP、Mg2+ 起始： mRNA、N-甲酰甲硫氨酰-tRNAfMet、mRNA的起始密码子（AUG）、30S核蛋白体亚基、50S核蛋白体亚基、起始因子（IF-1、IF-2、IF-3）、GTP、 Mg2+ 小结： 延长： 具有功能的70S核蛋白体（起始复合物）、密码子特