叶绿体色素提取和分离讲述.pptxVIP

叶绿体 色素提取和分离 中学 生物 实验 实验目的和材料 实验目的 初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法。 探索叶绿体中有几种色素。 实验材料 菠菜 实验原理 1、叶绿体中含有两大类色素（叶绿素和类胡萝卜素），它们溶于有机溶剂，因此可选用乙醇或丙酮进行提取。 2、层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂，叶绿体内的色素在层析液中的溶解度各不相同，溶解度越高，在滤纸上的扩散速度越快，反之则慢，可以将叶绿体中的色素分离开来。因此采用纸层析法进行分离。 实验原理 3、绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中，提取绿叶中的色素。（相似相溶） 4、SiO2：使绿叶充分研磨，释放叶绿体中的色素。 5、CaCO3：防止研磨时色素受到破坏。 叶绿体中色素组成 叶绿体中 的色素 叶绿体中色素的对比 项目 色素颜色 吸收光谱 滤纸色素层谱 叶绿素 叶绿素a 蓝绿色 红光 中下层、蓝绿色 叶绿素b 蓝绿色 蓝紫色 最下层、黄绿色 类胡萝卜素 胡萝卜素 橙黄色 蓝光 最上层、橙黄色 叶黄素 黄色 蓝紫光 中上层、黄色 实验步骤 用天平称取5克菠菜叶，剪碎 少许二氧化硅、碳酸钙+5ml丙酮 取单层尼龙布折叠，放入漏斗， 把漏斗放入试管，架到试管架上 将研磨好的菠菜叶加到漏斗中过滤 研钵 迅速、充分地进行研磨 提取： 注意：收集好的研磨液及时用棉塞塞紧。 二氧化硅：为了使研磨充分； 碳钙：保护色素免受破坏； 丙酮：色素的溶剂。 注意防止丙酮挥发。 实验步骤 铅笔画线，剪角 用毛细吸管吸取少量滤液 ，画线，重复2-3次 烧杯中倒入层析液（不要没过滤液线），将滤纸条轻轻插入，培养皿盖住小烧杯 分离： 具体实验步骤 1. 提取叶绿素 研磨法提取光合色素 材料剪碎 研磨法 加入有机溶剂 研磨、匀浆 过滤 提取液 实验结果 实验关键 选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的叶片。如菠菜叶、棉花叶、洋槐叶等。 画滤液细线时，应以细、直、颜色浓绿为标准，重复画线时必须等上次画线干燥衙再进行，重复2-3次。 层析时不要让滤液细线触及层析液 注意事项 因丙酮和层析液都是易挥发且有一定毒性的有机溶剂，所以研磨要快，收集的滤液要用棉塞塞住，层析时要加盖，尽量减少有机溶剂的挥发。 在研磨时要加少许二氧化硅，目的是为了研磨充分，有利于色素的提取；加少许碳酸钙的目的是为了防止研磨过程中，叶绿体中的色素受到破坏。 分离色素时，一定不要让滤纸条上的滤液细线接触到层析液，这是因为色素易溶解在层析液中，导致色素带不清晰，影响实验效果。 中学 生物