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表面等离子体共振成像与分析芯片 陈义，．c、王珍、黄吴文、余晓、齐莉 (中国科学院化学研究所分析与生命科学研究室／化学生物学联合实验室，北京100080) 自20世纪以来，分析科学一直面临着来自生命科学研究快速发展的巨大挑战，并因此高 速发展出了一系列新的分析方法。毛细管电泳及其相关技术在20世纪八、九十年代的迅猛发 展就是一例。但是挑战正愈演愈烈，摆在面前一项更困难任务是：如何在短时间内分析生物 (包括环境以及中医药等)复杂样品中的所有功能组分。这显然需要高通量分析方法和技术。 随着蛋白质组学研究的推进，能否以及如何解决这样的分析问题，将成为研究发展的瓶颈。 为迎接此类挑战，国际分析界在最近十年来，发展出了许多新的概念和方法，芯片分析 是为一种。分析科学中的芯片概念来自于计算机科学，但内涵和形式已经完全不同。分析芯 片大致可分为两类：一是分离检测式；二是识别传感式。 分离检测式芯片发源于毛细管电泳，主要采取微型通道设计结构，所以也叫微流通芯片。 通过对样品预处理【包括反应(如PCR)、萃取等】、进样、分离、检测等进行串联集成，期望 能够实现分析全程的芯片化，所以该类系统也叫微全分析系统(m—TA$)或芯片实验室 (Lab．on．a-chip)。进一步，通过通道的并列集成和多维联用，该方法有望实现高通量分析。微 流通芯片目前的研究重点包括：制造技术的发明和改进、新芯片材料发展、集成原理和模式 设计以及便携式分析系统研制等。将纳米科技和生物技术集成到此类芯片中，也是一种潮流。 我们在此方面作过一些试探。 传感识别式芯片的典型代表有DNA和蛋白质芯片等，通常构建成二维点阵，可以同时并 行分析许多分子，原则上具有高通量分析的本质特点。这类芯片方法的雏形是生物分析中的 96孔版(免疫或杂交)技术，其关键是芯片点阵的设计制作(识别探针微区域定位安布或合 成)和识别信号的显示和提取。应该说目前已经有不少很好的方法可以实现定位和显示阅读， 但是从实用方便性和成本角度考虑，还存在很多问题，需要发展新的方法，甚或开发完全不 同的原理。表面等离子体共振(SPR)可能正是一种值得研究的新原理。 SPR是一种表面光学现象。当光线在二维电子气界面发生全反射时会产生与界面垂直的 消失波，此消失波能和界面上的分子发生电磁相互作用，产生能量交换，最终导致反射波能 量的降低，由此可以研究界面分子的数量与性质。 7 分析系统，1983年始用于生物分析，1987年始用于成象分析。Knoll等在SPR成象研究中， 空间分辨率，提出了旋转光栅耦合装置。2000年，Johanson等成功地利用彩色摄像机实现SPR 成象。 SPR是一种无标记、不损坏样品分子的表面光学检测技术，这对获取生物分子的天然信 息非常有利，因此比目前多数需要标记才能实现灵敏检测的方法更具吸引力。SPR可以直接 研究分子之间的相互作用及其动力学过程，它还可以通过模拟生物环境来研究生物分子之间 的相互作用。SPR也具有定量和尺寸鉴别能力，包含分离技术的某些特点。最为重要的是， SPR可以发展成具有微米水平辨率的成像分析方法并且仪器系统小巧，成本不高(虽然商品 仪器很贵)。 上述特点表明，基于SPR的芯片技术具有诱人的特色，所以国际上已经开始了这方面的 研究。美国Wisconsin大学的RobertCorn(Corn教授也利用表面技术进行DNA计算研究) 等的研究很有启发性。我们从1997年开始SPR分析方法研究，设计建立了相关的分析和成像 分析系统，并由此展开了一些研究，已经可以得到比较理想的二维和三维芯片图像，届时将 予介绍。 项目的支持 8