临床检验基础实验课复习.doc

基本仪器 毛细吸管：10μl、20μl 改良牛鲍（Neubauer）计数盘： 1个计数池（3x3x0.1mm）=9个大方格 中央1个大方格（1x1x0.1mm）=25个中方格=400个小方格=1μl 四角1个大方格，平分为16个中方格 3、采血管：紫色：EDTA-K2 血常规检查 黑色：3.2%枸橼酸钠与血比例1:4 血沉检查 血液检验 一、血涂片染色 血涂片： 玻片不洁 角度 速度 血滴 推片边缘缺口 推片边缘弧形 空泡 过大：厚 过小：薄 快：厚短 慢：薄长堆积尾部 不匀：厚薄相间 过大：厚 小：薄 条样缺损 中央薄两头厚尾尖 瑞士染色 瑞氏染料：伊红（碱）、亚甲蓝（酸） 缓冲液：磷酸盐缓冲液（pH6.4-6.8） 时间：染料（I液）：5d左右，0.5-1min 缓冲剂（II液）：等量或稍多，5-10min 末梢采血 消毒：75%酒精 第一滴血因混有组织液，擦掉不用 静脉采血 消毒：30g/L碘酒，75%酒精 有抗凝剂或其他添加剂的混匀 四、血细胞计数 WBC计数 嗜酸粒计数 RBC计数 PLT计数 稀释液 2%冰乙酸 丙酮-伊红 Hayem液或枸橼酸钠甲醛盐水或生理盐水 1%草酸铵 稀释液作用 稀释及破坏成熟RBC，固定WBC 稀释，破坏RBC、其他WBC，使E着色 稀释 稀释，破坏RBC 稀释液量 0.38ml 0.38ml 2ml 0.38ml 血量 20μl 20μl 10μl 20μl 稀释倍数 20 20 200 20 计数区域 四角大方格 上下两池四角及中央五个大方格 中央大方格的五个中方格 中央大方格的五个中方格 沉淀时间 2-3min 3-5min 2-3min 10-15min 公式 N/4×10x20x106/L N×20x106/L N×5x10x200x106/L N×5x10x20x106/L 参考值 成人：（4-10）×109/L 新生儿：（15-20）x109/L 儿童：（15-20）x109/L （0.05-0.5）×109/L 成年男：（4.0-5.5）×109/L 成年女：（3.5-5.0）×109/L 新生儿：（6.0-7.0）×109/L （100-300）×109/L 校正 存在有核红时：100/（100+有核红） xN 白细胞分类计数 血涂片，瑞士染色 体尾交界处，“弓”形检查 比值 中杆 中叶 嗜酸 嗜碱 淋巴 单核 比例% 1-5 50-70 0.5-5 0-1 20-40 3-8 核左移：杆状核增多，出现幼稚中性粒 核右移：5叶以上中性粒3% MCV、MCH、MCHC 测定项目：RBC计数、Hb测定、Hct测定 Hb测定：血红蛋白仪法 试剂 预热 配制 参考值 文齐液（HiCN转换液） 水或文齐液预热30min 20μlEDTA-K2血+5ml文齐液 （混匀静置5min） 成年男：120-160g/L 成年女：110-150g/L 新生儿：170-200g/L Hct测定：温氏法 试剂 器材 读数 参考值 EDTA-K2血 水平离心机（2264g以上，离心30min），温氏管 RBC柱层毫米数x0.01 成年男：0.42-0.49 成年女：0.37-0,48 新生儿：0.47-0.67 血沉 魏氏测定方法 试剂 器材 时间 读数 参考值 109mmol/L枸橼酸钠抗凝血 魏氏血沉管，血沉架 1h RBC下降暴露的血浆长度（mm） 成年男：15mm/h 成年女：20mm/h 七、尿液常规检测 1、外观：颜色（淡黄、深黄、淡红、红色、乳白、浓茶、咖啡） 透明度（透明、微浑、浑浊） 尿蛋白定性 磺基水杨酸法 加热乙酸法 原理 磺酸根阴离子与尿蛋白氨基酸阳离子结合生成不溶性蛋白盐沉淀，沉淀程度与尿蛋白量成正比 加热煮沸使蛋白质变性，加入乙酸加速蛋白质沉淀 试剂 200g/L磺基水杨酸溶液 5%乙酸溶液 方法 1ml尿液+2d试剂 混匀，黑色背景下1min内观察（有空白对照） 加热（黑观察）→5%乙酸2-4d→加热（黑观察） 结果 肉眼可见微浑± 云雾状+ 颗粒++ 絮状+++ 大量絮状或凝块++++ 同左 方法学评论 灵明度高，应用于干化学法测尿蛋白，但若尿中存在高浓度尿酸（盐）、草酸盐等干扰因素或混入生殖系统分泌物时易造成假阳性结果。对白蛋白敏感而球蛋白不敏感。 操作略复杂，同样受生殖道分泌物的干扰成假阳性。对白蛋白和球蛋白都敏感 尿糖检测 对象 尿中的葡萄糖 原理 高热、碱性环境中尿液中葡萄糖或其他还原性糖的醛基能将蓝色的硫酸铜还原为氧化亚铜，出现黄色至砖红色沉淀 试剂 班氏试剂（改良班氏定性试剂） 方法 尿离心取上