【全程复习方】版高中生物 3.1.1基因工程概述课件 苏教版选修3.pptVIP

【解析】选B。基因表达载体中的标记基因有检测目的基因是否导入受体细胞的作用，若含有限制性核酸内切酶切割位点，被限制性核酸内切酶切割后不再具有标记作用。 第一节 基因工程概述 一、基因工程的概念理解 供体：提供___________ 操作环境：______ 操作水平：________水平 原理：__________ 受体：表达目的基因 本质：性状在_______受体体内表达 优点：克服________________障碍，定向改造生物_____ 远源杂交不亲和 目的基因 体外 DNA分子 基因重组 受体 性状 二、基因工程的工具——酶与载体 1.限制性核酸内切酶和DNA连接酶 形成______________ 将具有___________的2个DNA片段连接在一起 DNA连接酶 把DNA分子切割成不同的片段，产生________和平口末端 ______和______DNA分子内一小段特定核苷酸序列 限制性核酸内切酶 结果 作用 识别 切割 黏性末端 黏性末端 重组DNA分子 2.载体——运载工具 (1)功能：将_________导入受体细胞，并使其在受体细胞中 ________________。 (2)种类：_______、________以及一些动植物病毒。 (3)质粒：本质是细菌细胞中小型_________分子。 【点拨】提取目的基因和切割载体使用同一种限制性核酸内切酶，目的是能形成相同的黏性末端，形成重组DNA分子。 外源基因 稳定遗传和表达 质粒 噬菌体 环状DNA 三、基因工程的一般过程 1.获取___________ 2.制备_______________ 3.转化_________ 4.筛选出获得__________的受体细胞 5.培养受体细胞并实现__________________ 【点拨】在基因工程的操作中，只有转化受体细胞和筛选出获得目的基因的受体细胞步骤不出现碱基互补配对现象，其余都涉及碱基互补配对现象。 目的基因 重组DNA分子 受体细胞 目的基因 目的基因功能表达 基因工程的工具 1.与DNA相关的酶 (1)五种DNA相关酶的比较： 限制性核酸内切酶 DNA连接酶 DNA聚合酶 DNA (水解)酶 DNA解旋酶 形成产物 作用部位 作用底物 DNA分子 磷酸二酯键 黏性末端或平末端 DNA片段 磷酸二酯键 重组DNA分子 脱氧核苷酸 磷酸二酯键 子代DNA DNA分子 DNA分子 碱基对间的氢键 磷酸二酯键 形成脱氧核苷 酸单链 游离的脱氧核苷酸 (2)限制性核酸内切酶和DNA连接酶之间的关系图示： 2.作为载体的条件 便于重组DNA的鉴定和选择 具有特殊的标记基因 可携带多个或多种外源基因 有一个至多个限制性核酸内切酶切割位点 目的基因稳定存在且数量可扩大 稳定并能复制 适 应 性 条件 【高考警示钟】 关于限制性核酸内切酶使用的注意事项 (1)切割质粒需使用限制性核酸内切酶1次，切割目的基因则需要使用相同的限制性核酸内切酶2次。因为质粒是环状DNA，而目的基因在DNA分子链上。 (2)质粒DNA分子上限制性核酸内切酶切割位点的选择必须保证至少有一个标记基因是完整的，如果标记基因全部被切开则不便于鉴定与选择。 【典例训练1】(2011·浙江高考)将ada(腺苷酸脱氨酶基因)通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是( ) A.每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒 B.每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点 C.每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada D.每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子 【解题指南】 1.知识储备 (1)重组质粒必须具备的条件。 (2)目的基因导入成功的标志。 2.解题关键 (1)明确每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点。 (2)由题干信息“成功表达腺苷酸脱氨酶”推出目的基因导入成功，并能表达腺苷酸脱氨酶分子。 【解析】选C。ada为目的基因，大肠杆菌为受体细胞，将目的基因导入大肠杆菌时如果能成功表达说明每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒；要让目的基因与质粒形成重组质粒，两者必须用同种限制性核酸内切酶切割，所以每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点；质粒作为载体的条件之一是有多种限制性核酸内切酶的识别位点，但每种限制性核酸内切酶只有一个识别位点，只能插入一个目的基因(ada)；ada导入大肠杆菌成功的标志是表达腺苷酸脱氨酶，因此每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子。 【变式备选】如图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是( ) A．①②③④ B．①②④③ C．