发酵罐的认识.doc

生物工程工艺实验实验报告 学院：生物工程学院 专业：生物工程（微生物工程） 学号： 姓名： 天 津 科 技 大 学 生物工程工艺实验实验报告 生物工程学院 生物工程（微生物工程）专业 学号 姓名 实验日期：2013年12月17日 第2组 同组人董扬，宋萌，王晓晨，庞申，李耕文，徐蕾，崔香丹 实验名称：上海百伦离位灭菌机械搅拌双臂玻璃发酵罐的认识及灭菌 实验目的 了解上海百伦离位灭菌机械搅拌双臂玻璃发酵罐和其他配套设备的各组成部分名称及作用； 熟练掌握发酵罐的灭菌的步骤及注意事项； 掌握采用分光度计测量菌体浓度的方法及注意事项，绘制菌体浓度曲线。 二、实验原理 用于厌气发酵(如生产酒精、溶剂)的发酵罐结构可以较简单。用于好气发酵(如生产抗生素、氨基酸、有机酸、维生素等)的发酵罐因需向罐中连续通入大量无菌空气，并为考虑通入空气的利用率，故在发酵罐结构上较为复杂，常用的有机械搅拌式发酵罐、鼓泡式发酵罐和气升式发酵罐。 　　乳制品、酒类发酵过程是一个无菌、无污染的过程，发酵罐采用了无菌系统，避免和防止了空气中微生物的污染，大大延长了产品的保质期和产品的纯正，罐体上特别设计安装了无菌呼吸气孔或无菌正压发酵系统。罐体上设有米洛板或迷宫式夹套，可通入加热或冷却介质来进行循环加热或冷却。发酵罐的容量由300-15000L多种不同规格。发酵罐按使用范围可分为生物发酵罐、啤酒发酵罐、葡萄酒发酵罐等。 　　发酵罐广泛应用于乳制品、饮料、生物工程、制药、精细化工等行业，罐体设有夹层、保温层、可加热、冷却、保温。罐体与上下填充头（或雏形）均采用旋压R角加工，罐内壁经镜面抛光处理，无卫生死角，而全封闭设计确保物料始终处一无污染的状态下混合、发酵，设备配备空气呼吸孔，CIP清洗喷头，人孔等装置。 　　发酵罐的分类:按照发酵罐的设备,分为机械搅拌通风的和非机械搅拌通风发酵罐 　　按照微生物的生长代谢需要,分为好气型发酵罐和厌气型发酵灌 　　发酵罐是一种对物料进行机械搅拌与发酵的设备。该设备采用内循环方式，用搅拌桨分散和打碎气泡，它溶氧速率高,混合效果好。罐体采用SUS304或316L进口不锈钢，罐内配有自动喷淋清洗机头，确保生产过程符合GMP要求。 本次试验介绍的是上海百仑生物公司离位灭菌机械搅拌双臂玻璃5L发酵罐。 上海百伦是一套实验室全玻璃发酵设备，离位灭菌、椭圆形玻璃罐底，带水浴夹套，机械搅拌，操作方便、功能强大，可以满足各种目的的发酵，如批式、批式流加、单臂罐体为加热毯控温，其容积有2L、3L、5L、7L、10L等几种，灭菌锅离位灭菌，操作简单，是性价比最高的一台生物反应器，温度控制及其精确可以达到0.05℃，采用彩色触摸屏显示全部测量值和控制参数，大大方便了用户的操作。在控制箱正面安装了4个蠕动泵，可以向发酵罐补充酸，碱，消泡剂和培养基。发酵中各种参数如，pH、DO、温度和转速都能通过控制器监控，所有的数据和控制参数都可传到控制器或者计算机上。结构紧凑，各种组件都能集成在发酵系统上，结构设计与配置与欧洲主流发酵罐完全一致。 发酵罐的灭菌要求灭菌完全以防止杂菌的污染，其中所有进入到发酵罐的设备都要进行严格的灭菌处理，如温度电极、PH电极和消泡电极等。但传动装置不可灭菌，避免损坏。 测量菌体浓度是为了判断发酵进行到了那一阶段，是否需要补料等等。 三、实验仪器 上海百伦发酵罐（5L）、电脑、控制主机、空气压缩机、蒸汽发生器、冷凝水发生器等。 四、实验步骤 1. 上海百伦发酵罐 ⑴上海百伦发酵罐的结构简图 ⑵其他附属设备 空气压缩机：空气经过除菌后直接通入与发酵罐相连的控制主机上，用电脑控制空气流量的数值，用转子流量计调节流量的大小 。 灭菌锅：用于发酵罐的离位灭菌。 ⑶各部分作用 尾气冷凝管：长期与冷凝水相连进行冷凝尾气 投料口：将培养基从此口加入发酵罐，也要用灭菌圈 四通：可与大气相连通，也可以用来取样测菌浓 PH电极：监控发酵液的PH 温度电极：长度要足够长，插在夹套里防止被搅拌桨打到 消泡剂电极：当发酵过程中 发酵罐冷凝器：当发酵罐温度过高时，既要关闭电热夹套还要打开冷凝器，快速将温度降下来 电热夹套：控制发酵温度 空气分布器：定期在发酵罐中通入空气，保证菌体生长 溶氧电极：控制发酵罐中的溶氧量，保证发酵正常进行 取样口：定期的进行菌体浓度测量和产品含量测量 接种口：接种时在接种口加一圈酒精棉并点燃，将种子从灭菌环中倒入发酵罐 发动机：用来连接搅拌轴并为其提供动力（灭菌时可拆卸） 外部铁架框:用来放置补料瓶、酸（碱）瓶和消泡剂瓶 2.发酵罐灭菌 ⑴步骤 A校正电极 ①PH电极：进入主页面→系统设置→参数校正→在标准液（KCL