《基因工程》知识梳理及考点例析.doc

《基因工程》知识梳理及考点例析 基因工程考点主要涉及三个方面的内容。 一、基因工程的概念 基因工程是按照人们的意愿，把一种生物的个别基因复制出来，加以修饰改造，然后放入到另一种生物的细胞内，进而改造生物的遗传性状。在这一概念中，要把握好以下关系： 1．基因工程是狭义的遗传工程。 2．基因工程是一种分子水平上的体外操作技术。 3．基因工程导致的变异为基因重组，目的基因在受体细胞内的活动依然符合中心法则，其表达的产物是天然蛋白质。 4．利用基因工程进行育种具有定向性、目的性强、育种周期短和克服远缘杂交不亲和性的特点。 例1：①基因治疗是基因工程在医学上的应用之一，即把健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞中，达到治疗疾病的目的；②格里菲思实验：加热杀死的S型肺炎双球菌＋R型菌落→R型菌落+S型菌落。从变异的角度分析，①②变异的来源分别为（　　） A．①基因突变，②基因重组 B．①基因重组，②染色体变异 C．①基因重组，②基因突变 D．①基因重组，②基因重组 解析：格里菲思的肺炎双球菌转化其实质是灭活的S型菌中的控制S型菌相关性状的DNA（具有活性）分子进入到R型活菌内并进行表达，出现S型菌的性状，使R型菌转化为S型菌，这一过程与基因工程基本相同，因此与基因工程一样，其变异来源属基因重组。 答案：D 二、基因工程的操作工具 1．酶限制性内切酶DNA连接酶酶限制性核酸内切酶DNA连接酶多数来自原核生物①主要切割外源DNA，而对自身的DNA不起作用，达②只能识别双链DNA分子中特定的脱氧核苷酸序列；③只能在特定的部位进行切割，切割位点一般具有反DNA片段磷酸二酯键形成黏性末端或平末端使特定部位的两核苷酸之间的磷酸二恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之限制性核酸内切酶DNA连接酶酶酶二者虽都是蛋白质构成的酶，但组成和性质各不相同限制性核酸内切酶特定的脱氧核苷酸序列在特定的进行切割DNA连接酶DNA聚合酶DNA连接酶DNA片段之间形成磷酸二酯键，DNA酶是在单个核DNA片段之间形成磷酸二酯键。解析：酶1和酶3切割DNA的过程及形成的黏性末端分别如图a、图b，由图可知，这两种酶切割后形成的黏性末端相同。同理可分析其他任意两种酶切割出的黏性末端不同。 答案：D 2．载体 1）具备的条件①对受体细胞无害，不影响受体细胞正常的生命②具有标记基因，以便于鉴定目的基因是否进③能自我复制，通过复制进行基因扩增，否则可能会DNA丢失。④具有一至多个酶切位点，以便于目的基因的插入。⑤载体DNA分子大小应适合，以方便操作。 2）质粒酶切位点酶一至多个酶切位点将含有某种生物不同基因的许多DNA片段导入受体菌的群体中而储存，各个受体菌分别目的为获得大量的目的基因作准备。相当于某种生物的基因仓库，储 例4：右图所示全过程是（　　） A．构建基因文库 B．构建重组DNA C．构建基因表达载体 D．构建转基因工程菌 解析：图示显示用限制性核酸内切酶处理某种生物的基因组DNA，获得该种生物不同基因的许多DNA片断，然后分别与相应的载体形成重组DNA，再导入受体菌的群体中而储存，各个受体菌分别． 重组DNA分子的构建常指是用一定的限制酶切割质粒，使其出现一个黏性末用同种限制酶切割的目的基因，产生相同的黏性将切下的目的基因片段，插入到质粒的切口处，再DNA连接酶，使质粒与目的基因形成重组基因工程的基本操作程序是缺的构建运用限制酶切割目的基因和运载体时使用目的基因和载体限制酶．将导受体细胞转化受体细胞的种类植物：受精卵、体细胞可经组织培。 动物：受精卵因为体细胞的全能性受到抑制。3）转化实质：目的基因融合到受体细胞基因 （4）由于在导入过程中，只有少数受体细胞接纳重组DNA，所以要进行筛选。筛选时主要看质粒上的标记基因是否表达。如标记基因是四环素的抗性基因，则要把受体细胞放在有四环素的培养基上培养，凡导入成功的受体细胞由于四环素抗性基因的表达能够生长，没有导入的受体细胞则不能生长。 4．目的基因的表达 目的基因在受体细胞中是否表达，一是可通过产物检测，如采用免疫法把提取的蛋白质用相应的抗体进行“抗原－抗体”反应；二是对一些抗性基因的表达可通过作物个体水平上是否具有抗性来检测。 例6：在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。 请据图回答： （1）A过程需要的酶有 　　　　　 。经过A过程，由两个DNA片段之间连接形成的产物有 　　　 、 　　　 、 　　　 三种 。 （2）B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是 　 。