绿僵菌不同转化子毒力差异与胞外酶的相关性分析.pdfVIP

30(6)759-765 中国生物防治学报 Chinese Journal of Biological Control 2014 年 12 月 收稿日期：2014-03-24 基金项目：“十二五”农村领域国家科技计划课题（2011AA10A204-1，2012BAD19B01）；现代农业产业技术体系（CARS-35-07）；国家“948” 项目（2011-G4） 作者简介：李燕翠，女，硕士，E-mail：aluckyswallow@163.com；*通信作者，王广君，博士，副研究员，E-mail：guangjunwang@； 刘玉升，博士，副教授，E-mail：ysl@。 绿僵菌不同转化子毒力差异与胞外酶的相关性分析 李燕翠 1,2，张彦丰 1，刘春琴 3，农向群 1，曹广春 1，王广君 1*，刘玉升 2*，张泽华 1 （1. 中国农业科学院植物保护研究所/植物病虫害生物学国家重点实验室，北京 100081；2. 山东农业大学植物保护学院，泰安 271000； 3. 沧州市农林科学院，沧州 061001） 摘要：为了明确含有 cry8E 基因的绿僵菌 Metarhizium anisopliae 不同转化子存在毒力差异的原因，揭示胞 外酶与毒力之间的关系，本研究测定了 6 株含 cry8E 基因绿僵菌阳性转化子的酸性蛋白酶、中性蛋白酶、 碱性蛋白酶、几丁质酶和磷脂酶活性及其对暗黑鳃金龟幼虫 Holotrichia parallela 毒力，并分析了各个酶活 指标与菌株毒力之间的相关性。生测结果表明，不同转化子间毒力差异较大，LT50 的变化范围为 14.48～ 21.26 d，校正累计死亡率变化范围为 64.50%～92.86%。酶活测定结果表明，不同菌株之间活力差异较大， 且不同酶的活力变化规律不一致。将不同转化子的酶活分别与校正累积死亡率和 LT50 值进行一元回归分 析，发现各转化菌株酸性蛋白酶和几丁质酶与毒力相关显著。为了进一步确定酸性蛋白酶和几丁质酶对毒 力的综合影响，将不同转化子的酶活与校正累积死亡率、LT50进行二元回归分析，发现仅有几丁质酶活性 与菌株毒力相关性显著。因此，推测不同转化子对寄主毒力存在差异主要是由于菌株间几丁质酶活性不同， 几丁质酶可以作为大量转化子初步筛选的参考性指标，但是不能完全替代。 关 键 词：金龟子绿僵菌；暗黑鳃金龟；胞外酶；毒力；相关性 中图分类号：S476.12 文献标识码：A 文章编号：1005-9261(2014)06-0759-07 Correlation between Extracellular Enzyme Activity and Virulence from Different Transformants Containing cry8E Gene LI Yancui1,2, ZHANG Yanfeng1, LIU Chunqin3, NONG Xiangqun1, CAO Guangchun1, WANG Guangjun1*, LIU Yusheng2*, ZHANG Zehua1 (1. State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests/Institute of Plant Protection, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China; 2. College of Plant Protection, Shandong Agricultural University, Tai’an 271000, China; 3. Cangzhou Academy of Agriculture and Forestry Sciences, Cangzhou 061001, China) Abstract: In this study, we tested the acid protease, neutral protease, alkaline protease, chitinase, phospholipase enzyme activities of six Metarhizium anisopliae transformants with cry8E gene insertion and virulence against Holotrich