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走向高考 · 生物
路漫漫其修远兮 吾将上下而求索
人教版 · 高考总复习
生物技术实践
选修一
第四讲 生物技术
在其他方面的应用
选修一
1.从生物材料中提取某些特定的成分(Ⅱ)。
2.植物的组织培养(Ⅱ)。
3.DNA和蛋白质的提取和分离技术(Ⅱ)。
4.PCR技术的基本操作和应用(Ⅰ)。
一、植物的组织培养技术
1.组织培养过程
脱分化
愈伤组织
再分化
微量元素
植物激素
MS培养基
营养条件
调pH
MS固体
灭菌
70%的酒精
0.1%的氯化汞
无菌水
酒精灯
火焰灼烧
不要倒插
无菌箱
四分体时期
双核期
脱分化
愈伤组织
丛芽
材料的选择
培养基的组成
单核
25℃
光照
幼小植株分开
萼片和花瓣
花药
醋酸洋红
溶解度
0.14 mol/L
酒精
DNA
释放DNA
吸水涨破
单向
NaCl溶液
DNA
冷酒精
二苯胺
沸水浴
蓝色
DNA模板
引物
DNA聚合酶
三十
变性
延伸
指数
2n
凝胶色谱
分配色谱法
相对分子质量
的大小
带电性质
形状
血红蛋白
透析
较小
凝胶色谱
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
水蒸气蒸馏
水蒸气蒸馏
NaCl
无水Na2SO4
压榨
压榨
过滤
不溶于
易溶于
萃取
石油醚
干燥
过滤
纸层析
1.相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程可表示为①~④中的哪一种?
[提示] ②,分子质量较大者先洗脱出来,分子质量较小者后洗脱出来。
2.如图所示装置可用于血红蛋白提取、分离的哪种过程?其原理是什么?烧杯内a溶液是蒸馏水吗?
[提示] 该装置为透析装置,由于透析袋是用硝酸纤维素制成的小分子可自由进出,而大分子保留在袋内,故可用于除去小分子杂质,烧杯中的a溶液应为20 mmol·L-1的磷酸缓冲液,不可使用蒸馏水。
答案 C
解析 洗涤剂可瓦解植物细胞膜,利于释放DNA ,但不能增加DNA在NaCl溶液中的溶解度,A项错误;含DNA的丝状物应先溶解在物质的量为2 mol/L的NaCl溶液中,再加入二苯胺试剂在沸水浴条件下检测,冷却后观察变成蓝色,B项错误;菜花匀浆中含有多种酶,可影响到DNA的提取,C项正确;用玻璃棒缓慢搅拌滤液可使DNA分子充分溶解,可提高DNA的获得量,D项错误。
答案 B
解析 在烘干胡萝卜时要控制好温度和时间,温度太高、干燥时间太长,会导致胡萝卜素分解;在浓缩前萃取液要进行过滤,除去不溶物;将滤液用蒸馏装置进行蒸馏,蒸发掉有机溶剂,留下浓缩的胡萝卜素提取液。
(2)图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂是________。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值__________ (填“高”或“低”)时,有利于芽的分化。对培养基彻底灭菌时,应采取的灭菌方法是__________。
(3)图中外植体的消毒所需酒精的体积分数是__________。用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时,常用的酶是__________和纤维素酶。
(4)提取辣椒素过程中,萃取加热时需安装冷凝回流装置,其目的是____________________。
答案 (1)脱分化(或去分化) 再分化 (2)琼脂 低 高压蒸汽灭菌 (3)70% 果胶酶 (4)防止有机溶剂的挥发
解析 本题以辣椒素的获得途径为情景考查植物的组织培养、从生物材料中获取某些特定成分 、酶的应用等基础知识。
(1)图中①为脱分化,②为再分化。
(2)植物组织培养用的培养基为固体培养基,其中的凝固剂为琼脂,在生长素/细胞分裂素比值低的培养基中,利于芽的分化,对培养基彻底灭菌采用的方法是高压蒸汽灭菌法。
(3)外植体消毒用的70%的酒精灭菌效果最好,将愈伤组织解离成单细胞所需要的酶是果胶酶和纤维素酶。
(4)辣椒素是一种易溶于有机溶剂的有机分子,萃取剂易挥发,所以要安装加热冷凝装置,防止有机溶剂的挥发。
1.植物组织培养过程比较
植物组织培养技术
过程
形成体特点
条件
脱
分
化
由离体的器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程称为脱分化
排列疏松而无规则,是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞
①离体;
②提供营养物质;
③激素;
④提供适宜外界条件
再
分
化
脱分化产生的愈伤组织继续培养,又可以重新分化为根或芽等器官,这个过程称为再分化
有芽、根或有生根发芽的能力
2.植物组织培养技术和花药离体培养技术的比较
[高考警示] 生长素和细胞分裂素在植物组织培养中的作用的判断方法
(1)有生长素存在,细胞分裂素的作用呈现加强的趋势。
(2)使用顺序不同,结果不同,见下表:
使用顺序
实验结果
先生长素,后细胞分裂素
有利于细胞分裂,但细胞不分化
先细胞分裂
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