Dynabeads链霉亲和素磁珠探索.pptxVIP

  1. 1、本文档共24页,可阅读全部内容。
  2. 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
  3. 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载
  4. 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
  5. 5、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
  6. 6、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们
  7. 7、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
  8. 8、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
Dynabeads 链霉亲和素磁珠M-280 试剂盒 检测病毒核酸 产品介绍:本公司 M-280 链霉亲和素磁珠是统一规格、超顺磁性的聚苯乙烯磁珠,其表面被覆单层链霉亲和素,链霉亲和素以共价方式黏附于磁珠表面。本公司提供的磁珠产品以悬浮液方式包装,每 ml 含 10mg-Dyna 磁珠,磁珠的贮存液是 pH=7.4 的磷酸盐缓冲液,其中含 0.1%BSA 和 0.02%叠氮钠——作为防腐剂。 本公司提供不同包装规格的产品: No. 112.05 产品是 2ml 包装; No. 112.06 产品是 10ml 包装; No.602.10 是 100ml 包装。 产品介绍 链霉亲和素偶联的磁珠作为固相基质,可简便快捷、有效地与许多生物素化复合物结合,如:小分子,肽类,蛋白,抗体,糖类,凝集素,寡合核苷酸,DNA/RNA 等。 应用本公司的磁珠收集器(Dynal MPC) ,可高效率地收集磁珠、及随后实验操作靶分子。磁珠捕获、漂洗及检测等流程易于操作及体系优化。单层链霉亲和素以共价方式被覆在磁珠表面,确保较低的可忽略不计的失耦连率。磁珠上链霉亲和素的吸附无过多现象,能确保在您实验应用或检测中,不同批次试剂的变动小、结果重复性好 原理: 链酶亲和素磁珠 加入生物素标记分子 与生物素标记的分子结合 磁珠分离后,用于下游技术 磁珠分离 免疫磁珠法分离细胞原理示意图 M-280 磁珠的准备 使用前,需要洗去磁珠上防腐剂。应用磁珠收集器(Dynal MPC)可简化清洗程序。 1、轻轻摇晃装磁珠小瓶,悬浮磁珠,获得均匀一致的悬浮液。 2、根据需要,转移适当量磁珠悬浮液到备用管中。 3、将管子放在磁力架 1-2 分,在分离过程,不要将管子从磁力架上拿下来。 4、用移液器将管中上清移去(此时管置于磁力架上) ,避免移液器枪头触及管内壁(因磁珠附着于管内壁) 5、从磁力架上取下管子,根据您的特殊用途加入合适缓冲液,让缓冲液沿管内壁(磁珠积聚处)留下并轻轻悬浮,缓冲液用量与磁珠悬浮液等体积。 6、重复洗一次(步骤 3-5) ,然后放入适当体积缓冲液配制磁珠工作液。 使用说明 M-280 磁珠的准备(图解) 洗去防腐剂 弃掉上清液 沿管壁加入等量缓冲液 重复1次 备用液用液 轻轻摇晃 准备 1 磁力架 分离 Dynal 链霉亲和素磁珠液 M-280 不是去 RNA 酶的 7、向溶液 A 和溶液 B 加入 DEPC,使其终浓度达 0.1%,用力震荡。 8、室温放置 1 小时,高压灭菌。 9、用等体积溶液 A 洗磁珠两次,1-3 分钟 10、用等体积 B 洗磁珠一次。 11、用溶液 B 悬浮磁珠。 RNA 操作的准备 RNA 操作的准备(图解) DEPC DEPC 室温静置1h,高温灭菌 洗磁珠2次,1-3min 洗磁珠1次 悬浮磁珠 溶液 A::DEPC 处理的 0.1 M NaOH;DEPC 处理的 0.05 M NaCl 溶液 B:DEPC 处理的 0.1 M NaCI Dynal链霉亲和素磁珠M-280为多种分子水平操作、 亲和提纯及各种生物检测提供了一个很好的载体。捕获靶分子有直接法或间接法。间接方法中,首先向样品中加入生物素化配体,其与特异性靶分子结合形成复合物。此复合物与用于捕获的磁珠共孵育。鉴于生物素与链霉亲和素的强亲和力、快速结合活力, 间接捕获法可应用于配体-靶分子结合动力低或亲和力弱的实验中, 以使非特异性结合最小化。此法还可应用于配体浓度低、配体-靶分子结合需要最适空间构象及真正液相动力学的实验中。 固定程序 1.将 0.1 μmol 荧光修饰核苷酸溶于 0.7 ml 无菌蒸馏水中(用 Aminolink 2?试剂可合成 5’ 氨基修饰寡 核核苷酸。 ) 2. 加入 0.1 ml 的 1.0 M NaHCO3/Na2CO3 缓冲液,pH 值为 9.0. 3. 用一种酯类试剂 (Biotin-X-NHS-Ester) 让生物素贴附在氨基上。 将 10mg/ml 的 Biotin-X-NHS-Ester 溶液溶于二甲基甲酰氨中。取配好的此溶液 0.2 ml 加入反应混合物中。 4.室温放置 2 小时。 5. 用 NAP?-10 柱法去除痕量游离 Biotin-X-NHSEster。 6. 根据厂家说明书用反相 HPLC 法纯化生物素化寡核苷酸。 生物素化寡核苷酸引物(通过化学结合法完成 5’或 3’端氨修饰寡核苷酸的生物素化流程) 用 NAP?-10 柱法去除痕量游离 Biotin-X-NHSEster。 根据厂家说明书用反相 HPLC 法纯化生物素化寡核苷酸 PH=9 0.1 ml 的 1.0 M NaHCO3/Na2CO3 缓冲液 生物素化寡核苷酸引物 0.1umol荧光修饰核苷酸 0.7ml无菌蒸馏水 将 10mg/m

文档评论(0)

希望之星 + 关注
实名认证
文档贡献者

我是一名原创力文库的爱好者!从事自由职业!

1亿VIP精品文档

相关文档