回拨人类时钟的魔法—IPS技术.ppt

回拨人类时钟的魔法—IPS技术 报告人：叶瑱 2011.12.9 定义：通过转染特定的转录因子组合可以将已分化的体细胞重编程为多潜能干细胞，这种干细胞称为诱导性多潜能干细胞( induced pluripotent stem cells，IPS cells) 。 ISI Web of knowledge (2006-2011) 涉及IPS文章篇数 国内研究人员 周琪（中国科学院北京动物研究所） 主要成就： 2002年在《Science》上发表文章，首次在国际上利用克隆体细胞克隆大鼠。 2009年7月在《Nature》上发表文章，首次利用IPS细胞通过四倍体囊胚注射得到存活并具有繁殖能力的小鼠，从而在世界上第一次证明了IPS细胞的全能性。 2010年4月在《Journal of Biological Chemistry》发表文章，首次发现并明确证明了决定小鼠干细胞多能性的关键基因决定簇，可作为判断干细胞多能性水平的分子标识。 国内研究人员 肖磊（中国科学院上海生命科学研究所） 主要成就： 2009年1月在《Cell Stem Cell》上发表文章，首次建立大鼠IPS系。《Cell Stem Cell》对该发现做出专门评论。 2009年4月在《J Mol Cell Biol》上发表文章，完成了猪IPS细胞的建立。 国内研究人员 邓宏魁（北京大学） 主要成就： 2008年12月在《Cell Stem Cell》上发表文章，首次报道建立恒河猴（rhesus monkey）IPS系。 国内研究人员 高绍荣（北京生命科学研究所） 主要成就： 在世界上首次获得了由可诱导IPS细胞产生的四倍体互补小鼠，证明IPS细胞具有与正常ES细胞类似的真正多能性,被Times杂志评为2009年世界十大医学突破之一。 已经成功建立起病人特异的IPS细胞系并且正在集中研究这些病人特异的IPS细胞系的应用前景。 国内研究人员 裴端卿（中国科学院广州生物医药与健康研究院） 主要成就： 2009年5月在《J Biol Chem》上发表文章，报道建立西藏小型猪（Tibetan miniature pig）的IPS系。 2010年在《Cell stem Cell》上发表文章， 发现维生素C可以大大提高体细胞转化为IPS的效率，从原来的万分之一提高到10%，这一研究结果阐明了这个蛋白质与维生素Ｃ协同作用，对于细胞和再生医学研究具有广泛和深远的意义。 胚胎干细胞（embryonic stem cells, ES 细胞）： 从囊胚的内细胞团在适当的体外培养条件下而建立的细胞系. 在适当条件下， ES 细胞能分化成人体和动物的200 多种细胞类型, 甚至发育成为完整的个体。 局限性：建立ES 细胞要破坏胚胎， 而且需要使用卵细胞。特别是人的ES 细胞， 就引发了很多伦理学争议； 另外， 将受精胚胎所得到的ES 细胞应用于临床时病人还会面临免疫排斥问题，从而限制了ES 细胞在细胞替代治疗中的应用。 体细胞核移植或细胞融合可以重编程高度分化的体细胞，这说明在卵母细胞以及ES 细胞内可能含有一些可以启动细胞重编程的因子，可诱导体细胞表观遗传发生变化而重新获得发育多潜能性。那么， 是否可以直接应用相关转录因子对体细胞进行重编程而逆转终未分化细胞的发育潜能， 进而表现出ES 细胞那样的多潜能性呢？ 2006年，日本京都大学的Takahashi 和Yamanaka在《Cell》上发表了具有里程碑意义的文章，详细介绍了其用四个转录因子（Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc）将小鼠成纤维细胞逆转为类似多能干细胞的研究工作及结果，从此开创了IPS时代。 由于同时具备深远的科学价值和广泛的应用价值，IPS技术已成为当今生物学研究的热点，分别在2007年被《 Nature 》 、《 Science 》评为第一及第二大科学进展，又在2008年荣登《 Science 》十大科技进展榜首。2009年荣获阿尔伯特-拉斯克基础医学研究大奖（Albert Lasker Basic Medical Research Award） 。 IPS细胞形成低效率和部分重编程原因 通过病毒转导这些转录因子，可以重复形成IPS细胞，但是只有少部分的被转导的细胞能够在最后具有多能性。最初报道的具有克隆形成能力的IPS细胞，效率只有大约0.05％——这就意味着，平均在2000个成纤维细胞中，只有一个可以形成多能细胞。而且那些看起来具有多能性的细胞，实际上只有部分重编程，它们必须依赖转基因的外源因子持续表达。 低效率和部分重编程，对人的IPS在基础研究、药物筛选、毒理学及再生医学等方面的应用造成了巨大的障碍。这里提出了2种模型——原种模型和随机模型——来解释IPS的低效率和部分重编程原因。 假定原种模型：一小部分