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《微生物学》主要知识点-07 第七章 微生物的生长及其控制 PAGE  PAGE 5 第七章 微生物的生长及其控制 概述：微生物生长是细胞物质有规律地、不可逆增加，导致细胞体积扩大的生物学过程。微生物生长到一定阶段，由于细胞结构的复制与重建并通过特定方式产生新的生命个体即繁殖。在一定时间和条件下细胞个体和数量的增加即微生物的群体生长。 7.1 测定生长繁殖的方法 7.1.1 测生长量 1.直接法 ①测体积：一定培养液离心后观察菌体体积。 ②称干重：一定培养液经离心、洗涤、干燥后称重。 2.间接法 ①比浊法：用分光光度计在450~650nm波段测定。 ②生理指标法：测氮、碳、磷、DNA、RNA、ATP、DAP等。 7.1.2 计繁殖数 1.直接法 ①比例计数法：将已知颗粒浓度的液体与待测菌液按一定比例均匀混合，在显微镜视野中数出各自的数目，然后求出未知菌液中的细胞浓度。 ②血球计数板法 2.间接法 ①液体稀释法：MPN（most probable number）法。 ②平板菌落计数法 7.2 微生物的生长规律 7.2.1细菌的个体生长和同步生长：细菌的个体生长包括细胞结构的复制与再生、细胞的分裂与控制。目前研究细菌个体生长的方法有：一是电子显微镜观察细菌细胞的超微切片，二是使用同步培养技术（synchronous culture），即设法使群体中的所有细胞尽可能都处于同样细胞生长和分裂周期中，然后分析此群体的各种生物化学特征，从而了解单个细胞所发生的变化。通过同步培养而使细胞群体处于分裂步调一致的状态即同步生长（synchronous growth）。 获得细菌同步生长的方法： 1.环境条件控制技术：温度、培养基成分控制、光照等。2.物理学方法：梯度离心法、选择性过滤法。 7.2.2典型生长曲线（typical bacterial growth curve）：将少量纯种单细胞微生物接种到恒容积的液体培养基中后，在适宜的温度、通气（厌氧菌除外）等条件下，它们的群体会有规律地生长起来。以细胞数目的对数值作纵坐标，以培养时间作横坐标，可以画出一条有规律的曲线即微生物的典型生长曲线。根据微生物的生长速率常数（growth constant）,即每小时的分裂代数（R）的不同，一般可把典型生长曲线分为延滞期、指数期、稳定期和衰亡期。 The typical bacterial growth curve 典型生长曲线显示的四个时期：1.延滞期（ lag phase ）；2.指数期（ exponential or logarithmic phase ）；3.稳定期（stationary phase ）；4.衰亡期（death phase ）。 7.2.3 微生物的连续培养（continuous culture of microorganisms）：在微生物的整个培养期间，通过一定的方式使微生物能以恒定的比生长速率生长并能持续生长下去的一种培养方法。恒浊器（turbidostat）：根据培养器内微生物的生长密度，并借光电控制系统来控制培养液流速，以取得菌体密度高、生长速度恒定的微生物细胞的连续培养器。恒化器（chemostat）：使培养液流速保持不变，并使微生物始终在低于其最高生长速率条件下进行生长繁殖的一种连续培养装置。 7.3 影响微生物生长的主要因素 7.3.1 温度(Temperature)：Bacteria have a minimum, optimum, and maximum temperature for growth and can be divided into 3 groups based on their optimum growth temperature: 1.嗜冷菌-Psychrophiles are cold-loving bacteria. Their optimum growth temperature is between -5 oC and 15 oC. They are usually found in the Arctic and Antarctic regions and in streams fed by glaciers. 2.嗜中温菌-Mesophiles are bacteria that grow best at moderate temperatures. Their optimum growth temperature is between 25 oC and 45 oC. Most bacteria are mesophilic and include common soil bacteria and bacteria that live in and on t