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第37讲 基因工程
第十单元 现代生物科技专题
[2014最新考纲]
1.基因工程的诞生(Ⅰ)
2.基因工程的原理及技术(Ⅱ)
3.基因工程的应用(Ⅱ)
4.蛋白质工程(Ⅰ)
考点突破
基础整合
题组演练
一、基因工程的概念及基本工具
1.概念
基因工程,又叫基因拼接技术或 重组技术,通俗地说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种 提取出来,加以 然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的 。
2.基因工程的基本操作工具
(1)限制性核酸内切酶——“分子手术刀”。
①来源:主要是从 中分离纯化出来的。
②特点:能够识别双链DNA分子的某种 ,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的 断开。
③结果:产生 。
(2)DNA连接酶——“分子缝合针”。
①作用:将切下来的 拼接成新的DNA分子。
DNA
基因
修饰改造
遗传性状
原核生物
特定核苷酸序列
磷酸二酯键
黏性末端或平末端
DNA片段
粘性末端
粘性末端
平末端
(3)基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”。
①种类: 、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。
质粒
自我复制
限制酶切割位点
标记基因
二、基因工程的基本操作程序
基因文库
PCR技术
启动子
标记基因
三、基因工程的应用与蛋白质工程[判一判]
1.动、植物基因工程利用转基因技术可以改善畜产品品质。( )
2.基因治疗是将修复的基因导入人体达到治疗疾病的目的。( )
3.蛋白质工程是对蛋白质的氨基酸或蛋白质的空间结构进行操作,来改造蛋白质的技术。( )
4.蛋白质工程流程是:预期蛋白质功能→设计预期蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到对应的基因。( )
农杆菌化法
花粉管道法
显微注射
DNA分子杂交
分子杂交
抗原---抗体杂交
个体生物学水平
√
×
×
√
[体验式自评]
1.(多选题)下列有关基因工程及基本工具的说法正确的是( )
A.每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点(2011·浙江理综)
B.限制酶只能用于切割目的基因
C.DNA连接酶能将两碱基间通过形成氢键连接起来
D.E·coli DNA连接酶既可连接平末端,又可连接黏性末端
E.质粒是小型环状DNA分子,是基因工程常用的载体
F.基因工程是利用重组DNA技术将外源DNA直接导入有机体的生物技术
2.(2013安徽马鞍山模拟)关于DNA重组技术基本工具的说法正确的是( )
A.DNA连接酶只能连接双链DNA片段互补的黏性末端
B.细菌细胞中含有的限制酶不能对自身DNA进行剪切
C.限制酶切割DNA后一定能产生黏性末端
D.天然的质粒可以直接用来作为载体
AE
B
3.在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中,下列操作错误的是( )
A.用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸
B.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体
C.将重组DNA分子导入烟草原生质体
D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞
4.关于蛋白质工程的说法,正确的是( )
A.蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作
B.蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子
C.对蛋白质的改造是通过直接改造相应的mRNA来实现的
D.蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是相同的
[体验式自评]
A
B
[网络图构建]
限制性核酸内切酶
基因治疗
基因表达载体的构建
考点一 基因工程的工具
[考点归纳]
(1)五种DNA相关酶的比较
作用底物
作用部位
形成产物
限制酶
DNA分子
磷酸二酯键
DNA连接酶
DNA片段
磷酸二酯键
DNA聚合酶
脱氧核苷酸
磷酸二酯键
DNA解旋酶
DNA分子
碱基对间的氢键
DNA (水解)酶
DNA分子
磷酸二酯键
1.与DNA分子相关的酶
(2)限制酶与DNA连接酶的关系:
①限制酶不切割自身DNA的原因是:原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。
②DNA连接酶起作用时不需要模板。
黏性末端或平末端
重组DNA分子
子代DNA
形成脱氧核苷酸单链
游离的脱氧核苷酸
考点一 基因工程的工具
2.载体的作用和条件
(1)作用:
①作为运载工具,将 转移到宿主细胞内。
②利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量 。
(2)具备的条件:
①能在宿主细胞内稳定保存并大量复制。
②有一个至多个
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