缺血后调适对骨骼肌缺血再灌注损伤的保护及其机制的初步探讨.docVIP

缺血后调适对骨骼肌缺血再灌注损伤的保护及其机制的初步探讨 张景达，阳富春，阳茂春，刘军廷，胡 峰，王静威(广西医科大学第一附属医院创伤骨科手外科，广西医科大学再生医学研究所，广西壮族自治区南宁市 530021) 引用本文：张景达，阳富春，阳茂春，刘军廷，胡峰，王静威. 缺血后调适对骨骼肌缺血再灌注损伤的保护及其机制的初步探讨[J].中国组织工程研究，2016，20(37):5530-5537. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.37.009 ORCID: 0000-0003-3245-2426(阳富春) 文章快速阅读： 文题释义： 缺血后调适：又名缺血后处理或缺血后适应，是指在组织缺血后立即施予几个短时程的再灌注/缺血操作，可以引发内源性保护组织缺血再灌注损伤的现象。研究认为，缺血后调适能介导和激活一系列信号级联反应，从而减轻由缺血再灌注引起的细胞凋亡与坏死，发挥其保护作用。 缺血后调适方案可降低骨骼肌缺血再灌注损伤：再灌注挽救激酶信号通路主要由PI3K-Akt和MEK1/ 2-Erk1/2两条重要信号通路组成，再灌注挽救激酶信号通路在缺血预调适和后调适过程中激活了对组织缺血再灌注损伤保护机制的关键环节。 摘要 背景：再灌注损伤挽救激酶信号通路在缺血预调适和后调适引发的组织器官缺血再灌注损伤保护机制中均起重要作用。目前国内外有关缺血后调适对心肌缺血再灌注损伤保护通路机制的研究较多，而对骨骼肌缺血再灌注损伤保护信号通路机制研究较少。 目的：探索后调适方案对大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤的保护作用及再灌注损伤挽救激酶通路机制。 方法：将18只雄性SD大鼠随机等分为缺血再灌注组、缺血后调适组和对照组。缺血再灌注组给予右侧股动脉无创动脉夹夹闭使远端肢体缺血4 h，松开再灌注24 h；缺血后调适组在缺血4 h后立即施加4个循环30 s再灌注/30 s缺血操作，再灌注24 h；对照组分离右侧股动脉不予以处理。 结果与结论：①苏木精-伊红染色显示，与缺血再灌注组相比，缺血后调适组骨骼肌纤维结构病理改变程度较轻，少见炎性灶，肌细胞水肿程度明显改善；②TTC染色结果显示，缺血后调适组的梗死面积小于缺血再灌注组；③Western blot结果显示，缺血后调适组的磷酸化Akt、磷酸化内皮型一氧化氮合酶-S1177蛋白表达量较缺血再灌注组明显增加；而磷酸化内皮型一氧化氮合酶-Thr495的蛋白表达较缺血再灌注组显著降低；④Ca2+诱导线粒体通透性转换孔开放测试结果：缺血后调适组线粒体吸光度的降低程度较缺血再灌注组更为明显。⑤结果表明，缺血后调适能显著减轻大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤，其机制可能通过激活再灌注损伤挽救激酶信号通路作用于线粒体通透性转换孔，限制其开放，从而增强大鼠骨骼肌对缺血再灌注损伤的耐受能力。 关键词： 组织构建；组织工程；缺血再灌注损伤；骨骼肌；缺血后调适；再灌注损伤挽救激酶通路；Akt；内皮型一氧化氮合酶；线粒体通透性转换孔；国家自然科学基金 主题词： 肌, 骨骼；再灌注损伤；组织工程 基金资助 广西自然科学基金资助项目(2011GXNSFC018021)；国家自然科学基金项目 Ischemic post-conditioning protects against ischemia-reperfusion injury in the skeletal muscle: a preliminary research on its mechanism Zhang Jing-da, Yang Fu-chun, Yang Mao-chun, Liu Jun-ting, Hu Feng, Wang Jing-wei (Department of Trauma Orthopedics Hand Surgery, the First Affiliated Hospital of Guangxi Medical University, Institute of Regenerative Medicine of Guangxi Medical University, Nanning 530021, Guangxi Zhuang Autonomous Region, China) Abstract BACKGROUND: Reperfusion injury salvage kinase (RISK) pathway plays an important role in protective mechanism against ischemia reperfusion injury (IRI) induced by both isc