第二章受精的機制.pptVIP

第二章 受精的机制; 受精(fertilization)是两性生殖细胞融合产生具备双亲遗传潜能的新个体的过程。受精是发育的开端，一个新的生命从此开始。 受精的第一个功能是将父母的基因传给子代；第二个功能是在卵母细胞质中激发一系列确保发育正常进行的反应。;受精——卵和精子;受精过程一般涉及以下几方面： 卵母细胞成熟 精子获能 精卵间的接触和识别 精子入卵 卵的激活并开始发育;第一节 卵母细胞成熟和排放; 受精在第二次减数分裂中期。如绝大多数脊椎动物和文昌鱼等。 受精是在已经完成两次减数分裂之后。例如海胆和腔肠动物等。 以上划分并不十分严格，还有许多例外，例如海胆在受精过程中发现以上四种情况都有。;卵母细胞（长期停留在第一次减数分裂前期的双线期）；恢复减数分裂：停止在第二次减数分裂中期；成熟卵：等待受精。;卵母细胞???熟的标志;形态学标志为：生发泡破裂，染色体聚集，纺锤体形成和第一极体排出。 分子水平变化为：细胞内cAMP浓度下降，Ca2+浓度上升，蛋白质合成增加，蛋白质去磷酸化或磷酸化，促成熟因子之类的生物活性物质出现。;排卵(ovulation)：在体内外诸因素(环境、神经、 激素、酶等)作用下卵子由卵巢排出。 卵子的成熟和排放是互不依赖的两个过程，只有适当成熟的卵子才能受精。;减数分裂的再启动;无活性前体MPF由调节亚基cyclinB和催化亚基p34cdc2组成，磷酸酯酶（cdc25 基因产物）使p34cdc2 Thr－14，Tyr－15去磷酸化，Thr－161保持磷酸化状态，使MPF活化→G2/M→M。 受精：Ca2+内流→钙调蛋白激活→活化酪蛋白激酶（CKⅡ）→pp39mos降解 →CSF解体→cyclinB降解→MPF无活性→M→G1。 ;爪蟾卵成熟分裂的机制;第二节 精子获能;精子获能（capacitation)：哺乳动物精子必须在雌性生殖管道内发生精子膜等的一系列变化（如精清蛋白的去除、膜表面蛋白的重组等）才能获得使卵子受精的能力。;哺乳动物精子的获能，牛精子在到达输卵管壶腹部之前与输卵管上皮细胞的接触。;一、获能精子蛋白激酶活性的改变影响获能 1、PKA ( cAMP-dependent protein kinase） 1个具调节活性的R二聚体+2个催化活性的C单体。;2、PKC（protein kinase C）;3、PTK(protein tyrosine kinase,PTK );附睾精子获能时其蛋白Tyr磷酸化依赖于培养基中的BSA、Ca2+、HCO3- ，它们依赖cAMP。 胸腺素肽（Tα1、Tβ4）：人精液和卵泡液中。 Tα1：提高精子穿透裸卵的速率；增加95kDa 、51kDa 蛋白的Tyr磷酸化提高获能； Tα1Tβ4。 51kDa 蛋白（受精抗原－1，FA－1）：FA－1单抗处理人精子，可减少95kDa 、51kDa 蛋白的磷酸化。 氧化条件， Tyr磷酸化提高，还原条件下降低。;二、源于雄性生殖道的受精促进肽(fertilization promoting peptide，FPP);FPP连接肽：Gln－FPP改变腺苷和FPP的生物活性。 TCP－11（t－complex）：FPP受体；FPP和TCP－11有刺激精子获能和抑制顶体丢失作用。FPP和/或TCP－11丢失或结构改变导致精子膜结合的FPP浓度下降，可能与人的低生育力有关。;第三节 精卵识别的分子基础;精卵识别（recognition of egg and sperm) 距离识别：体外受精的水生动物； 接触识别：体内受精，在滤泡细胞、透明带和卵质膜等3个独立的水平上准确地相互作用。;一、精子的距离识别：趋向性 趋向性：海胆卵分泌14个氨基酸的精子激活肽（resact） 。 resact+receptor（sperm） →鸟苷酸环化酶活化 →cGMP升高→动力蛋白 ATPase活化 →精子尾部摆动。;加入10 nM resact 1纳升后，海胆精子的聚集。A——D示加入呼吸活化肽1、20、40、90秒后的观察结果。;二、 具受体功能的精子表面蛋白;哺乳动物透明带 （zona pellucida，ZP） 透明带糖蛋白 ZP1 ZP2 ZP3 (83kDa)：终端半乳糖;ZP3在小鼠精子与透明带的结合中的作用。;三、参与配子间质膜相互作用的分子;ADAM;fertilin＝ α－fertilin（ADAM1）+β－fertilin（ADAM2）异源二聚体； fertilin的加工：成熟精子中只有IV－VIII 区。 剔除β－fertilin 基因会影响精子多方面功能并致雌性不育：如 A. 减少精子从子宫到输卵管的迁移； B. 减少精子与ZP结合； C. 降低精卵结合能