第2章植物组织培养的基本原理.ppt

第二章 植物组织培养的基本原理;第一节 细胞全能性与细胞分化; 1934年, White用离体的番茄根建立了第一个活跃生长的无 性系，使根的离体培养实验首次获得了真正的成 功。提出B族维生素的重要性。 1944年，Skoog报道DNA的降解产物腺嘌呤, 可以促 进愈伤组织的生长，解除生长素对芽形成的抑 制作用，诱导芽的形成。 1958年, Steward和Reinert由培养的胡萝卜细胞诱导形成了 胚状体。 1965年, 由Vasil和Hildebrandt用单个分离的细胞培养 获得整个植株, 植物细胞全能性的理论真正得到 了科学的证实。 ;;;;;二、细胞分化：;第二节 植物的脱分化;2、愈伤组织的来源、与起始材料的差异;3、脱分化的作用机理 ;4、愈伤组织形成过程：;(2) 分裂期：细胞迅速分裂时期 外植体外层细胞开始迅速分裂，中央细胞常不分裂，由于分裂不均匀，形成了中间静止的芯。 细胞分裂快，结构松散、颜色浅、透明。 细胞质变浓，核仁和核增大，液泡变小，RNA含量增高，表明合成和代谢旺盛进行。 细胞逐渐回复到分生状态，这一过程称为回复变化。即脱分化。细胞数目增加迅速，出现小的愈伤组织。 分裂期要经常更换培养基来保持其增殖但不分化的状态，这种培养叫做继代培养，使用的培养基叫做继代培养基。;分裂期;(3)分化期. 细胞体积大小稳定、细胞由平周分裂转为垂周分裂。 在分化末期，细胞的形态和结构上出现形态、功能不同的区域。;5、 愈伤组织的生长过程的特点：;松散型;第三节 细胞的再分化;二、植株再生的方式：;通过器官发生形成再生植物通常有三种方式： 先生根，再长芽。 先产生芽，再生根。 愈伤组织不同部位形成根、芽，通过维管组织将根、芽连结在一起。;;2、体细胞胚胎发生（somatic embryogenesis）： 特点：双极性结构，由单个体细胞形成胚状体，最后发育生长为一个植株。 ;三、极性与细胞的不均等分裂在分化中作用; 合子经过短期的休眠后进行不均等分裂，产生一个较大的基细胞(basal cell)和一个较小的顶端细胞(apical cell)。 顶端细胞经若干次分裂后形成原胚，再依次经过球形期、心形期、鱼雷形期和成熟期最终成为成熟胚.; 在分裂初期，生殖细胞和营养细胞的细胞质中，细胞器没有差异。 小孢子分裂的末期产生的成膜体，形成一个细胞板，随后，变为分隔营养细胞和生殖细胞的壁。由于胞质分裂高度的不均等性，形成大小悬殊的营养细胞和生殖细胞。;茎切段有极性。 2、作用： 使细胞内生活物质的定向和定位，表现两极分化，导致两极不对称性。 3、决定因素： 微管结构决定细胞分裂的取向，决定着细胞最终的形态。 质膜作为接受外界刺激的最初反应部位，其局部变化及其与微丝的结合可能是极性形成并稳定的基础。;微管的结构 微管(microtubule)是存在于细胞质中的由微管蛋白(tubulin)组装成的中空管状结构。 ;细胞骨架的作用: 维持细胞形态、保持细胞内部结构的有序性 与细胞运动、物质运输、能量转换、信息传递、细胞分裂、基因表达、细胞分化等生命活动密切相关。 现代细胞生物学把细胞骨架系统和细胞的生物膜系统、遗 传物质系统并列为细胞的三大系统。;第四节 植物体细胞胚的发生;特点：;二、体细胞胚的发生过程：;Comparison of moncot and dicot and gymnosperm somatic embryosA. Somatic embryo of orchardgrass growing from an embryogenic callus: coleoptile and notchB. Somatic embryo of grape growing from an embryogenic callus: two flattened cotyledons and subtending hypocotylC. Somatic embryo of Norway spruce: multiple cotyledons and elongated hypocotyl.;胚性愈伤组织与非胚性愈伤组织的区别：;三、胚状体发生的方式：;小麦幼胚愈伤组织诱导;四、体胚发生的机理：;五、体胚发生的生理生化变化：;4、金属离子： 乙烯的产生会抑制体胚的发生。与乙烯产生有关的离子与体胚的产生也有密切的关系。Ag+、Co2+、Ni2+可提高体