温故知新
1、概念区分
原代培养和传代培养 细胞株和细胞系 杂交细胞、杂交瘤细胞、特异性杂交瘤细胞、杂种细胞、重组细胞 B淋巴细胞、骨髓瘤细胞、杂交瘤细胞优缺点
2、细胞工程的原理方法、水平
3、植物组织培养的原理、过程
4、植物体细胞杂交的原理、过程
5、细胞产物工厂化生产的步骤
6、动物细胞培养的原理,诱导方法
7、动物细胞培养的条件(抑制杂菌、碳源、特殊添加、气体)
8、植物组织培养和动物细胞培养的区别(原理、培养基性质、成分、结果、目的); 温故知新
9、动物核移植技术的原理、过程
10、卵细胞做受体细胞的优点
11、动物细胞融合的原理、方法、应用
12、传统方法获取抗体有何不足
13、动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较(原理、前提、诱导、结果、用途、意义)
14、单克隆抗体的制备过程
15、单克隆抗体的应用
16、两次筛选的目的、生物导弹的结构;2.植物组织培养和植物体细胞杂交的比较;[特别提醒]
①表示植物细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成。
②植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株,而不是形成
杂种细胞就结束。杂种植株特征:具备两种植物的遗传特征,原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。;1.植物组织培养依据的原理、培养过程的顺序及诱导的植
物激素分别是 ( )
①体细胞全能性 ②离体植物器官、组织或细胞
③根、芽
④生长素和细胞分裂素 ⑤生长素和乙烯 ⑥愈伤组织 ⑦再分化 ⑧脱分化 ⑨植物体;2.下列关于植物体细胞杂交的叙述,错误的是 ( )
A.不同种植物原生质体融合的过程属于植物体细胞杂
交过程
B.原生质体仍具有再生细胞壁,连续分裂并长成完整
植株的能力
C.参与杂种细胞的细胞壁形成的细胞器主要是线粒体
和核糖体
D.植物体细胞杂交技术可克服不同种植物之间的不亲
和障碍;(4)应用
①生产病毒疫苗、单克隆抗体、干扰素等。
②利用动物细胞培养技术中的细胞贴壁生长和接触抑制的特点,可用烧伤病人自己的健康皮肤细胞培养出大量的自身薄层皮肤细胞,以供植皮所需。
③培养的动物细胞用于检测有毒物质,判断物质的毒性。;3.回答下列与动物细胞培养有关的问题:
(1)在动物细胞培养过程中,当贴壁细胞分裂生长到细胞表
面________时,细胞会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的________。此时,瓶壁上形成的细胞层数是________。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来,需要用酶处理,可用的酶是______________。;(2)随着细胞传代次数的增多,绝大部分细胞分裂停止,进而出现________的现象;但极少数细胞可以连续增殖,其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成________细胞,该种细胞的黏着性________,细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量________。
(3)现用某种大分子染料,对细胞进行染色时,观察到死细胞被染色,而活细胞不染色,原因是_________________
_________________________________________________。
(4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目,最好选用细胞分裂到________期的细胞用显微镜进行观察。;(5)在细胞培养过程中,通常在________条件下保存细胞。因为在这种条件下,细胞中________的活性降低,细胞________的速率降低。
(6)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后,发生了排斥现象,这是因为机体把移植的皮肤组织当作________进行攻击。;答案:(1)相互接触 接触抑制 单层(或一层) 胰蛋白酶
(2)衰老甚至死亡 不死性 降低 减少
(3)由于活细胞的膜具有选择透过性,大分子染料不能进入活细胞内,故活细胞不能着色(或由于死细胞的膜丧失了选择透过性,大分子染料能够进入死细胞内而着色) (4)中 (5)冷冻(或超低温、液氮) 酶 新陈代谢 (6)抗原;(2)制备过程
;(3)应用
①作为诊断试剂:准确识别各种抗原物质的细微差异,并与一定抗原发生特异性结合,具有准确、高效、简易、快速的优点。
②用于治疗疾病和运载药物:主要用于癌症治疗,可制成“生物导弹”,也有少量用于治疗其他疾病。;[特别提醒] 单克隆抗体制备过程中两次筛选的目的
第一次筛选是将未融合的B淋巴细胞、骨髓瘤细胞以及BB融合、瘤瘤融合的细胞通过选择培养基淘汰,筛选出B瘤融合的细胞。
第二次筛选是将产生特定抗体的B瘤细胞通过细胞培养用相应抗原检测的办法筛选出来。因为从体内取免疫过的B淋巴细胞时会取出很多种,形成的杂交瘤细胞有很多种,所以需筛选出产生特定抗体的杂交
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