第8章疾病与人类健康(基因治疗).ppt

基因治疗;概念 美国的联邦食品与药品管理局( FDA) 于1993 年给出的定义是: “基于修饰活细胞遗传物质而进行的医学干预。细胞可以体外修饰,随后再注入患者体内；或将基因治疗产品直接注入患者体内,使细胞内发生遗传学改变。这种遗传学操纵的目的：预防、治疗、治愈、诊断或缓解人类疾病”;1、体细胞基因治疗 ( somatic gene therapy) 治疗基因转移到体细胞内使之表达基因产物,以达到治疗目的； 只影响受试者本人,而与后代无关。 2、生殖细胞基因治疗(germline gene therapy) 将治疗基因转移到患者的生殖细胞或早期胚胎内的一种基因疗法； 永久地改变后代的遗传组成,其目的是要预防后代患特定的遗传疾病。;生殖细胞基因治疗是体细胞基因治疗的延伸与扩展； 各国均禁止将生殖细胞基因治疗用于临床； 我国于1993年制定了《人的体细胞治疗和基因治疗临床研究质控要点》，明确规定仅能进行???细胞基因治疗。;特点;基因治疗发展经历的3个阶段;基因治疗的3Y原则;伦理原则;基因治疗中存在的技术难点;常用病毒载体系统;（1）反转录病毒载体;1981年，Wei等构建了第1个反转录病毒载体；临床上应用最多的以小鼠白血病病毒为基本骨架构建的反转录病毒载体。;优点: 宿主细胞广泛, 能够感染不同生物种类的多种类型细胞; 能高效的感染分裂细胞, 感染率高达100%; 能使外源基因整合到宿主细胞染色体上。;新进展;2）腺病毒载体;;优点: 1) 人类是腺病毒的天然宿主, 所以比较安全; 2) 该病毒在体外稳定, 易于制备与纯化; 3) 宿主范围广, 既可感染分裂细胞, 又可感染非分裂细胞; 4)可原位感染, 特别是肺, 可经口服, 喷雾, 气管内滴注等多途径进行治疗; 5) 外源基因表达水平较高。;不足之处: 1) 它几乎可以感染所有的细胞, 因此缺乏特异性; 2) 不能整合到宿主染色体上, 所以不能持续表达所需产物, 表达时间短暂, 需重复给予载体制剂治疗; 3)因可能刺激免疫反应, 使反复治疗的效果会逐渐降低。;（3）腺相关（腺伴随)病毒载体;优点: 目前尚未发现该病毒在人体中致病, 所以比较安全; 感染宿主细胞广泛,包括非分裂细胞和分裂细胞, 特别是能够感染神经元和神经胶质细胞; 能特异整合于人的第19号染色体长臂末端, 减少了插入突变的可能性; 外源基因表达稳定, 3个月至1.5年。;不足之处： 难以大量生产 复制需要辅助病毒 包装外源基因的能力有限, 小于5 kb 临床的应用受到一定限制 亟需建立稳定表达rep和cap的细胞系，但rep表达的毒性可能是其困难所在;（4）单纯疱疹病毒载体;优点: 宿主范围广, 包括大量哺乳动物和鸟类的分裂细胞和非分裂细胞; 载体易于操作; 包装外源基因的能力大, 可插入长达50kb 的外源基因。; 杆状病毒侵入哺乳动物细胞:内吞;血友病的基因治疗;帕金森病（PD）的基因治疗;肿瘤基因治疗的基本策略1. 癌基因表达的反义抑制策略;肿瘤基因治疗的基本策略2 抑癌基因克隆和表达策略;肿瘤基因治疗的基本策略3.宿主免疫功能增强策略;肿瘤基因治疗的基本策略4 .肿瘤治疗药物前体的转换策略;肿瘤基因治疗的基本策略?5.多药抗性基因的转移策略