6-3动物微生物--抗原抗体凝集实验和抗原抗体沉淀实验(实验七).pptVIP

实验七 经典免疫学检测技术： 抗原抗体凝集实验和抗原抗体沉淀实验 一 、凝集反应 二 、沉淀反应;一、凝集反应;凝集反应：在一定浓度的电解质溶液中，颗粒性抗原(如红细胞)与相应抗体结合后，出现肉眼可见的凝集块。由于凝集反应方法简便，目前在临床检验中仍被广泛应用。 ;　　人类ABO血型抗原主要有A和B两种，根据红细胞表面这两种抗原的有无,可把血型分为四种。据此，将抗A和抗B的抗体分别与待测红细胞混合，抗A或（和）抗B的抗体与红细胞表面上的相应抗原结合而引起红细胞凝集，据其凝集情况便可判定出受试者的血型。;;　（1）ABO血型鉴定试剂盒内含: 抗A血清：为蓝色 抗B血清：抗B为黄色） 　（2）一次性采血针1枚、洁净玻片、75％酒精、灭菌棉签。 　（3）生理盐水;3.实验方法;3.实验方法;3.实验方法;　　记录受检者红细胞凝集情况，根据ABO血型鉴定表，判断受检者的血型。 　　　; (二)志贺杆菌玻片凝集实验; ; 4.注意事项： （1）生理盐水、诊断血清要适量； （2）待检菌为肠道致病菌，注意无菌操作， 玻片用后，酒精擦过后，放入消毒缸内； （3）用接种环取待检菌时，不要挑取琼脂； 待检菌与生理盐水、诊断血清混匀时， 不要涂得太宽，否则影响结果观察。 ; 现象 结论; 二、沉淀反应 ; 二、沉淀反应 ;3.材料 （1）人血清、兔抗人血清。 （2）1.5%琼脂（用生理盐水或巴比妥缓冲液配成）。 （3）载玻片、移液枪、水浴锅、玻璃管等。;4. 方法 1)．制备琼脂玻片：将已知加热溶化的1.5%琼脂3.5ml(已制备好,在水浴锅中)，迅速倾入载玻片上。（每2人倒一个玻片） 2)．打孔：待凝固后用打孔器(玻璃管)按下图样打孔。（孔径3mm，孔距4mm）（每1人打一个梅花） ;3)．加样 以上方孔为第1孔，按顺时针方向分别称为2、3、4、5和6孔，中央孔为7孔。7孔加入1:10人血清10 ?l(已稀释好) ，1-5孔加入对倍稀释的兔抗人血清（原液，1:2，1:4，1:8，1:16） 10 ?l ；6孔加入 生理盐水10 ?l ， 作为阴性对照孔。;4)．温育 置湿盒37℃温育12-24 h。 ;4)．温育 置湿盒37℃温育12-24 h。 5. 结果观察 以出现明显沉淀线的最高稀释度为该兔抗人血清的效价。 记录琼脂玻片双向扩散是否有沉淀线,分布在哪几档稀释度之间? 并画图。;;