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分子生物学 1、原癌基因：正常细胞中的癌基因，其表达产物对细胞正常生长起调控作用，当被激活时能导致细胞生长分化异常，形成肿瘤，又称细胞癌基因。 2、分子克隆：也叫DNA克隆，在体外对DNA 分子按一定目的和方案进行人工重组，将重组分子导入合适宿主，使其在宿主中扩增和繁殖，以获得该DNA分子的大量拷贝。 3、RFLP：多源性出现在限制性核酸内切酶的酶切位点序列中，用某个限制性核酸内切酶水解基因组的某段序列，在同种的不同个体之间该段序列可能被酶水解成不同的几个DNA片段，这段序列在该种生物的群体中形成多态性。 4、SNP：是由基因组DNA上单个碱基的变异引起的DNA序列多态性。 5、蛋白质组：是指一个基因组所表达的全套蛋白质。 6、感受态细胞：细菌生长过程中，只有某一个阶段的细菌才能成为转化的接受体。 7、回文结构：双链DNA分子上按对称轴排列的反向互补序列。 8、转化：将重组的DNA分子导入细菌，使其在细菌的体内中扩增及表达的过程。 9、卫星DNA：在DNA链上串联重复多次的短片段碱基序列。 10、CDNA文库：以细胞全部mRNA经逆转录制备出全套CDNA。 11、穿梭载体：是原核生物载体的基础上进行适当的改造，构建出同时带有两种细胞的复制起始点，并可在两种细胞中复制和存在的载体. 12、人类基因组计划HGP：是指历史上第一个有全世界各国部分大小、部分强弱、科学家共同参与、一起执行的一项科研项目,目标是确定人类DNA碱基对的序列，从机体与功能的角度识别人类基因组中的基因并将其绘制成图。 13、克隆：指细胞通过无性生殖以后所产生的与亲代细胞完全相同的子代群体。 14、同尾酶：一些限制酶识别和水解靶序列虽然不同，但产生相同的黏性末端，称为同尾酶。 15、多基因家族：是指由某一祖先基因经过重复和变异所产生的一组基因。 16、转导：将外源DNA直接导入真核细胞的过程称为转导。 17、异源同工酶：指来源不同，但能识别和切割同一位点标的酶为同工异源酶，不能相互代替。 18、假基因：在多基因家族中，某些成员并不产生有功能的基因产物，这些基因称为假基因。 一、原核生物基因组特征 1、DNA较小，一般在10的6次方到7次方、2、无典型的细胞核，但形成拟核、3、操纵子结构是原核生物基因组的功能单位、4、具有编码同工酶的基因、 5、含有可移动的DNA序列、6、基因一般是连续的无内含子、7、仅有一个复制起点。 二、真核生物基因组特征 细胞核基因组的DNA与蛋白质结合形成染色体，除配子细胞外，体细胞有两个同源染色体，因此有两份同源的基因组，染色体储存于细胞核内，是基因组遗传信息的载体。 细胞核基因组特征：1、细胞结构基因为单顺反子结构 2、细胞基因大多有几个不连续的编码基因组成 3、DNA序列中有不同的重复片段 4、具有多基因家族和假基因 5、基因具有多态性 6、基因中存在基因重叠现象 7、染色体末端存在端粒 细胞质基因组特征：1、在细胞核外自行复制表达2、几乎所有的真核细胞都有3、主要存在线粒体和叶绿体中。 三、真核生物中重复序列的类型、高度重复序列的功能 类型：高度重复序列、中度重复序列、低度重复序列 高度重复序列的功能： 1、参与复制水平的调节、 2、参与基因表达的调节 3、参与转位作用、 4、与进化有关、 5、与个体特征有关、 6、与染色体减数分裂时染色体配对有关。 四、原癌基因的激活机制与方法及癌基因的类型 癌基因类型：细胞癌基因、病毒癌基因两类。 激活机制：一类是病毒诱导活化，另一类是非病毒诱导活化，如染色体重排 1、原癌基因获得外源启动子而激活 2、原癌基因甲基化程度降低 3、原癌基因的扩增 4、原癌基因的突变 5、染色体易位或基因重排 6、基因偶联 五、抑癌基因失活的机制与概念 概念：抑癌基因又称肿瘤抑制基因，是存在于正常细胞内的一类可抑制细胞过度生长于增殖的基因，有潜在的抑癌作用。 失活的机制：1、抑癌基因突变、2、染色体丢失、3、同源性重组、4、基因重排 六、转座元件的遗传效应 1、引起突变：转座可引起基因多种突变，插入失活、转录终止、缺失和到位。 2、引入新基因：某些抗生素的抗性基因。 3、基因重排：产生具有生物学功能的蛋白质。 七、常见的DNA与RNA病毒 DNA病毒：SV40病毒、腺病毒、乙型肝炎病毒 RNA病毒：丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒 八、核酸分离纯化的步骤 1、破碎、裂解组织细胞、2、去除与DNA、RNA结合的蛋白质、多糖。 3、纯化DNA、RNA，去除盐累及有机溶剂。 十、质粒提取步骤 1、细菌培养物的生长、2、细菌的收获和裂解、3、质粒DNA的纯化。 十一、分子克隆的步骤 目的基因的获取、2、目的基因与载体基因的链接、3、重组DNA分子导入受体细胞、4、重组体的筛选和鉴定、5、载体的选择。 十二、常