第五章酶剖析.ppt

第五章 酶;; 第一节 酶的分类与命名;酶是生物催化剂;二、酶的分类 1、按化学组成分： 单纯蛋白酶 结合蛋白酶 2、根据酶分子的结构特点： 单体酶 寡聚酶 多酶复合体;;;主要包括脱氢酶(dehydrogenase)和氧化酶Oxidase)。 如，乳酸(Lactate)脱氢酶催化乳酸的脱氢反应。 ;例如， 谷丙转氨酶催化的氨基转移反应。; 主要包括淀粉酶、蛋白酶、核酸酶及脂酶等。 例如，脂肪酶(Lipase)催化的脂的水解反应： ; 主要包括醛缩酶、水化酶及脱氨酶等。 例如， 延胡索酸水合酶催化的反应。 ;例如，6-磷酸葡萄糖异构酶催化的反应。;合成酶，又称为连接酶，能够催化C-C、C-O、C-N 以及C-S 键的形成反应。这类反应必须与ATP分解反应相互偶联。 A + B + ATP + H-O-H ===A ? B + ADP +Pi 例如，丙酮酸羧化酶催化的反应。 丙酮酸 + CO2 ? 草酰乙酸;;（二）国际系统命名法;第二节 酶催化作用的特性;1、酶具有高效催化性;2、酶具有高度专一性;1、活化能降低 酶促反应： E + S === ES === ES* ?? EP ?? E + P?;反应过程中能的变化;E+S;1、锁钥学说;锁钥学说：; 2、诱导契合学说;诱导契合学说;第四节 酶结构与功能的关系;;主要包括： 亲核性基团：丝氨酸的羟基，半胱氨酸的巯基和组氨酸的咪唑基。;酸碱性基团：门冬氨酸和谷氨酸的羧基，赖氨酸的氨基，酪氨酸的酚羟基，组氨酸的咪唑基和丝氨酸的羟基，半胱氨酸的巯基。 ;二 变构酶;酶的别构（变构）效应示意图;一般是寡聚酶，由多亚基组成，包括催化部位和调节（别构）部位； 具有别构效应。指酶和一个配体（底物，调节物）结合后可以影响酶和另一个配体（底物）的结合能力。 天冬氨酸转氨甲酰酶受CTP 的抑制、ATP的激活、 ;三 酶原及酶原的激活 ;胰蛋白酶原;胰蛋白酶原;第五节 酶促反应动力学; 在低底物浓度时, 反应速度与底物浓度成正比，为一级反应。 底物浓度增大与速度的增加不成正比,为混合级反应. 当底物浓度达到一定值，几乎所有的酶都与底物结合后，反应速度达到最大值（Vmax），此时再增加底物浓度，反应速度不再增加，表现为零级反应。 ;1913年，德国化学家Michaelis和Menten根据中间产物学说对酶促反映的动力学进行研究，推导出了表示整个反应中底物浓度和反应速度关系的著名公式，称为米氏方程。 ; 根据中间产物学说，酶促反应分两步进行:;;米氏方程 ;米氏常数Km的意义P162;; 米氏常数的测定; 1 Km 1 1 ??? = ?? ? ??? + ?? V Vmax [S] Vmax ;酶的Km在实际应用中的意义;从米氏方程中求得： 当反应速度达到最大反应速度的90%，则;二 pH 的影响;pH;三 温度的影响;高温两种不同影响： 1.温度升高，反应速度加快； 2.温度升高，酶热变性速度加快。 低温影响： 1.温度降低，酶活性降低 2.温度过低,酶无活性但不变性 ;四 激活剂对酶作用的影响;金属离子：K+、Na+、 Mg2+、Cu2+、Mn2+、Zn2+、Se3+ Co2+、Fe2+ 阴离子： Cl-、Br 有机分子 还原剂：抗坏血酸、半胱氨酸、谷胱甘肽 金属螯合剂：EDTA - 这些离子可与酶分子上的氨基酸侧链基团结合，可能是酶活性部位的组成部分，也可能作为辅酶或辅基的一个组成部分起作用;一般情况下，一种激活剂对某种酶是激活剂，而对另一种酶则起抑制作用； 对于同一种酶，不同激活剂浓度会产生不同的作用。 ;五 抑制剂对酶活性的影响;抑制剂类型和特点 ; 抑制剂与酶的必需基团以共价键结合，引起酶活力丧失，不能用透析、超滤等物理方法除去抑制剂而使酶复活。 ;1、非专一性不可逆抑制剂;2、专一性不可逆抑制剂 ;（二） 可逆抑制 抑制剂与酶蛋白以非共价方式结合，引起酶活性暂时性丧失。抑制剂可以通过透析等方法被除去，并且能部分或全部恢复酶的活性。根椐抑制剂与酶结合的情况，又可以分为三类;1 竟争性抑制;;竞争性抑制作用特点：;2 非竟争性抑制;非竞争性抑制作用;非竞争性抑制特点： 1）、抑制剂与底物结构不相似，抑制剂与酶活性中心以外的基团结合。 2）、Vm下降，Km不变 3）、非竟争性抑制不能通过增大底物浓度的方法来消