第五章固定化酶探讨.pptVIP

第五章 固定化酶与固定化细胞;第一节 酶的固定化; 优点： ①极易将固定化酶与底物、产物分开，简化了提纯工艺，提高酶的使用效率； ②在大多数情况下，能够提高酶的稳定； ③可以在较长时间内进行反复分批反应 和装柱连续反应； ④?酶反应过程能够加以严格控制； ⑤?较游离酶更适合于多酶反应。 ;; 1．物理吸附法 酶被物理吸附于不溶性载体的一种固定化方法。 常用载体：活性碳、氧化铝、硅胶、淀粉、纤维素、树脂。 优点：操作简单，酶活性中心不易被破坏和酶高级结构变化少，酶活力损失很少。 缺点：酶与载体相互作用力弱、酶易脱落等。 ;2．离子结合法 酶通过离子键结合于具有离子交换剂的水不溶性载体的固定化方法。 常用载体：各种阴、阳离子交换剂。 如CM-纤维素、DEAE-纤维素、DEAE-葡聚糖凝胶等 优点：操作简单，酶活性中心不易被破坏和酶高级结构变化少，酶活力损失很少。 缺点：载体和酶的结合力 比较弱，酶易脱落。 ;3.共价结合法 酶与载体以共价键结合的固定化方法。 ①?将载体有关基团活化，然后与酶有关基团发生偶联反应。 ②?在载体上接上一个双功能试剂（常用的如戊二醛），然后将酶偶联上去。 ;优点：酶与载体结合牢固，不易轻易脱落。 缺点：反应条件苛刻，操作复杂，易引起酶蛋白高级结构