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食品微生物检的验技术.pptVIP

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食品微生物检的验技术

;一、定义; 二、食品微生物检验的内容;三、食品微生物检验的特点; 五、食品卫生细菌常规检验项目 菌落总数测定 大肠菌群测定 沙门氏菌检验 致病菌 志贺氏菌检验 金黄色葡萄球菌检验 溶血性链球菌检验;第一章 食品微生物检验中的生理生化实验 ;二、细胞色素氧化酶实验原理; 阳性: 不抑菌, 变混浊 阴性:抑菌 ;四、硝酸盐还原实验原理 KNO3 还原酶 KNO2 KNO2+对氨基苯磺酸+ ? -萘胺 红色化合物 (立刻或数分钟内) 五、糖发酵实验 分解糖产酸,PH值下降,使培 养基的酸碱指示剂发生变化。 阳性:产酸产气;六、氧化发酵实验(O/F实验) 有些微生物分解葡萄糖必须有氧参加,此种细 菌称为氧化型; 有些细菌有氧无氧均可分解葡萄糖,称发酵型; 有些细菌任何条件都不能分解葡萄糖,称产碱 型。 ;七、甲基红实验(MR实验)和V-P实验 1、MR实验原理:一些细菌分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸可被进一步分解为甲酸、乙酸、乳酸和琥珀酸而使培养基的PH值下降到4.5以下,加入甲基红指示剂出现红色反应;2、V-P实验原理 一些细菌分解葡萄糖为丙酮酸,进一步脱羧产生乙酰甲基甲醇,乙酰甲基甲醇在碱性溶液中被空气中的氧氧化成二乙酰丁二酮,进而与培养基内蛋白胨中所含的精氨酸的胍基发生反应生成红色化合物。(实验结果同MR实验) 八 、柠檬酸盐实验(枸橼酸盐实验) 一些微生物可以以铵盐作为唯一 的氮源,以柠檬酸盐作为唯一的碳 源,在柠檬酸盐培养基上生长,分 解柠檬酸盐生成碳酸盐,使培养基 变成碱性,酸碱指示剂变色。 ; 九、丙二酸钠实验 一些微生物可以以丙二酸钠 作为唯一碳源,分解丙二酸钠 生成碳酸钠,使培养基变成碱 性,酸碱指示剂变色。 十、马尿酸盐实验 一些细菌可以水解马尿酸生 成苯甲酸和甘氨酸,苯甲酸 和Fe3+反应生成有色的苯甲酸 盐沉淀。; 十一、明胶液化实验 一些细菌可产生胞外酶,使明胶蛋白分解为氨基酸,而失去明胶的凝固能力。 十二、苯丙氨酸脱氨酶实验 一些细菌有苯丙氨酸脱氨酶, 可以脱氨 生成苯丙酮酸,其 与FeCl3反应产生绿色 。;十三、氨基酸脱羧酶实验 一些细菌可以产生氨基 酸脱羧酶使氨基酸脱酸, 产生胺类物质,使培养基 变碱,酸碱指示剂变色。 十四、尿素实验 一些细菌可以产生尿素酶, 使尿素分解产生大量的胺, 使培养基变碱,培养基指示 剂变色。;十五、靛基质实验(吲哚实验) 一些细菌可以分解蛋白 胨的色氨酸,产生靛基质, 靛基质可与对二甲氨基苯 甲醛作用,生成玫瑰吲哚 而成红色。 十六、ONPG实验( 检测?-半乳糖苷酶) 邻硝基酚--?--D半乳糖苷 ?-半乳糖苷酶 邻硝基酚 + ?--D半乳糖 ;十七、淀粉酶实验 一些细菌可产生淀粉 酶将淀粉分解为双糖或 单糖,加入碘不变色。 十八、卵磷脂酶实验 一些细菌产生卵磷脂酶, 可以分解卵磷脂产生甘油 脂和水溶性的磷酸胆碱, 在菌落周围形成一个乳白 色的沉淀或浑浊带。; 十八、脱氢酶实验 微生物有脱氢酶,可使氯 化三苯四氮唑(TTC)还原, 由无色变为红色。 十九、三糖铁实验 1、成分:牛肉膏、蛋白胨(氮源) 三糖:葡萄糖0.1%、乳糖1%、蔗糖1% 硫酸亚铁 琼脂 培养基摆成高层斜面 PH值调到7.4 ; 黄 PH6 指示剂酚红 砖红色 PH=7(大约) 红色 PH7 2、接种(1)穿刺接种 (2)斜面划线接种 36oC培养18--24小时 3、观察结果 (1)分解葡萄糖、乳糖、蔗糖: 斜面产酸变为黄色(阳性), 底层产酸变为黄色(阳性) ;(2)分解乳糖、蔗糖,不分解葡萄糖: 斜面、底层

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