第二章 发酵液预处理和固液分离.ppt

第二章 发酵液的预处理和固液分离;;为何要对发酵液进行预处理？;预处理的目的; 残存培养基成分及副产物会对后续提取精制操作产生不利影响。 ;2、发酵产物浓度低，悬浮液中大部分是水。;6、发酵液中含有色素、毒性物质、热源物质等，对产品的质量安全及卫生标准产生不利影响。; 这些特性使得发酵液的过滤相当困难，必须要对其进行适当预处理，改善其流体性能，降低滤饼比阻，才能提高过滤与分离效率。;1、菌体分离 2、固体悬浮物的去除 3、杂蛋白质去除 4、金属离子去除;5、色素、热原、毒性物质去除 6、改变发酵液性质，以利于后续提取精制等工序进行 7、调节适宜的温度和pH值。 ; 第一节 发酵液过滤特性的改变;★一、改变发酵液过滤特性的物理化学方法; 降低液体的粘度可以有效提高过滤的速率。 ;; 2）升温法 在适当升高温度的情况下，可使部分蛋白质凝聚，形成较大的凝聚物，进一步改善发酵液的过滤特性。 ;; 加热时必须严格控制温度和时间： A、加热温度不能影响目的产物的活性及其他性质。避免氧化、分解、变性等。 B、加热时间不能太长，否则会使细胞溶解，胞内物质大量外溢，增加发酵液的复杂性，影响目的产物的分离纯化。;2、调节pH;? ; pH值的调整需要注意： 注意保护目的物活性，一般不宜过酸或过碱，加酸或加碱时要慢慢地边加边搅拌，避免局部浓度过高，引起目的产物变性。 ; 采用凝聚与絮凝技术能有效的改变细胞、细胞碎片及溶解大分子物质的分散状态，使其聚结成较大的颗粒，便于提高过滤速率。 还能有效的除去杂蛋白质和固体杂质，提高滤液的质量，因此絮凝与凝聚是目前工业上最常用的预处理方法之一。 ; ★凝聚和絮凝的概念 凝聚和絮凝的概念，过去常常混淆，现已趋于明确区分。 ;★凝聚（Coagulation） 是指在电解质作用下，由于胶粒之间扩散双电层电位下降，电排斥作用降低，破坏胶体体系的分散状态，使之不稳定相互凝集成1mm左右块状凝聚体的现象。 ;★絮凝 指在某些高分子絮凝剂的作用下，基于架桥作用，使胶粒交联成团、形成10mm大小的较大絮凝团的过程。; 发酵液中的细胞，菌体或蛋白质等胶体粒子表面，一般都带有电荷，带电的原因有很多，主要是吸附溶液中的离子和自身基团的电荷。 在生理pH之下，发酵液中的菌体和蛋白质常常带有负电荷。; 由于静电引力的作用，使溶液中带相反电荷的阳离子被吸附在其周围，在界面上形成双电层。; 但是这些正离子还受到使它们均匀分布开去的热运动的影响，具有离开胶粒表面的趋势，在这两种相反的力的影响下，双电层就分裂成两部分，在距胶粒表面约一个离子半径的平面(Stern平面)以内，正离子被紧紧束缚在胶核表面，称为吸附层或紧密层。; 在Stern平面以外，剩余的正离子则在溶液中扩散开去，距离越远，浓度越小，最后达到主体溶液的平均浓度，称为扩散层。这样就形成了双电层的结构模型。 ;胶体双电层结构;; 宏观上而言，当胶粒在溶液中作相对运动时，总有一薄层液体，随着它一起滑动，这一薄层厚度比吸附层稍大，滑动面用波纹线表示。 ; 在上述的结构中，在不同的界面上就会形成不同的电位： Фs是胶粒表面上的电位，是整个双电层的电位； Фd是Stern平面上的电位； ξ是滑动面上的电位，称为ξ电位或电动电位。;; 此外，由于胶粒表面的水化作用，形成了包围于粒子周围的水化层，也能阻止胶粒间的直接凝聚。但是水化膜主要是伴随胶粒带电而引起的，一旦ξ电位降低或消除，水化层也会随着减弱或消失。; 之所以加入电解质会使得胶粒之间发生聚集，正是由于电解质的加入降低了胶粒的ξ电位，减弱了胶粒间的电排斥作用，并使水化膜降低或脱除，从而发生聚集。;D—水的介电常数 q----胶体的电荷密度，及滑动面上的电荷密度， 单位库伦/m2 δ----扩散层的有效厚度，m。即为吸附层和扩散层界面处电位Фd降低到其值为1/e处的距离，不能直接测定。;δ— 扩散层的有效厚度;; 由此可见，在发酵液中加入具有高价阳离子的电解质，由于ξ电位的降低和脱除胶粒表面水化膜，就导致了胶粒间的凝聚作用。; 凝聚价或凝聚值： 使胶粒发生凝聚作用的最小电解质浓度（mmoL/L)，称为凝聚价或凝聚值。 ;Schulze－Hardy法则（叔米-哈第）：