产GABA发酵乳杆菌的筛选、发酵条件优化及其谷氨酸脱羧酶基因的克隆.pdfVIP

???? 广 东农 业科 学 ????年第 ?期? 产 ????发酵乳杆菌的筛选 、发酵条件优化? 及其谷氨酸脱羧酶基 因的克隆? 林 谦 ，姜康 怡 ，韦素娟 ，郭丹妮 ，农石蓉 ，高? 敏? ?玉林 师 范学 院生命 科学 与技 术 学院 ，广 西 玉林 ???????? 摘? 要 ：从 酸 菜 汁 中分离 到 一株 具 有 谷 氨酸 脱 羧酶 活力 的乳 酸 菌 ???，经 过 ????????序 列 分析 鉴 定 为发 酵 乳? 杆 菌 ?????????????????????????。????在含 ?％ ?一谷 氨 酸钠 的 ???培养 基 中 ，???? 的产量 达 到 ?．????／?。对 ???产? ????的碳 源 、氮 源 、初 始 ??进 行 了初 步 优化 ，确 定最 佳 条 件 为 ：以 蔗糖 为 主要 碳 源 ，以蛋 白胨和 牛 肉膏 为 氮 源 ，初? 始 ????．?，在 此条 件下 ，????产 量达 到 ?．????／?。通过 ???顺 利 地扩增 出了 ???菌 株 的谷 氨酸脱 羧 酶 ????基 因 ，将? ???产 物与 表达 载体 ?????—??连 接 。测序 结果 表 明 ，???的谷 氨酸脱 羧 酶与 ?????????????????????????一?的谷 氨酸? 脱羧 酶序 列一 致性 达到 ??％。重组 酶与 组氨 酸标 签融 合表 达 ，经镍 柱 亲和 层析 纯化 出融 合 蛋 白 ，电泳 显 示 出 ??????? 的 目的条 带 ，纯 化 的重组 酶表 现 出了酶 活性 ??．????／???。? 关键 词 ：发酵 乳杆 菌 ；???氨基 丁酸 ；谷 氨 酸脱 羧酶 ；克隆 ；序 列分 析? 中 图分 类号 ：????．?? 文献 标识 码 ：?? 文章 编 号 ：????—????????????—????—??? ???????????????????????????????????????????????????，? ????? ????????? ????????????????????????????????? ????????????????????? ??????????????????????? ????????，?????????????，???????????，???????—??，?????????????，???????? ?????????????????????????????????????????????????????????????????????????，??????? ????????：???