植物内生细菌XG32菌株16SrRNA寡核苷酸探针杂交条件优化和特异性验证.pdfVIP

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???.?????.?? 第 ??卷第 ?期? 南京 师大学报 ?自然科学版 ?? ????年 ?月? ?????????????????????????????????????????????????????????????? ???.?????? 植物 内生细菌 ????菌株 ????????寡核苷酸? 探针杂交条件优化和特异性验证? 刘? 佳 ,王梅霞 ,闰淑珍 ,陈双林? ?南京师范大学生命 科学学 院 江苏省微 生物工程技术研究中心,江苏 南京 ???????? ?摘 要?? 为了能利用荧光原位杂交方法来研究植 物 内生细菌 ????菌株在植 物体 内的定 殖和 分布 ,利用 ????? 菌株的 ????????中段特异性序列和 ???????数据库 ,用 ?????、???????和 ?????软件设 计了一个 在理论上 具? 有特异性的探针 ,在优化该探针的杂交条件基础上 ,通过与 ??个亲缘关 系相邻和相近的菌株反 复杂交来验证 探? 针 的特异性.结果 显示 ,????探 针适 宜的杂交 条件 为 :杂 交缓 冲液 中甲酰 胺浓度为 ??% ,????浓度为 ?.?????/? ?,杂交温度 为??℃ ,清洗缓冲液 中 ????浓度为 ?.??????/?;探针 与 ????菌株杂交信号明显 ,与其他菌株均不能? 杂 交.综上所述 ,设计 的探 针是 ????菌株 的特异性探针.? ?关键词 】? 荧光原位杂交 ,杂交条件优化 ,特异探 针验证? ?中图分类号 ?????.?? ?文献标识码 ??? ?文章编号 ???????????????????????????

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