牛心朴子细胞学特性的研究.pdfVIP

一 352一 江苏农业科学 2012年第40卷第6期 贝盏临，张 欣，曹君迈，等．牛心朴子细胞学特性的研究[J]．江苏农业科学，2012，40(6)：352—354 牛心朴子细胞学特性的研究 贝盏临，张 欣，曹君迈，雷 茜 (北方民族大学生物科学与工程学院，宁夏银川750021) 摘要：以沙生植物牛心朴子为材料 ，对其细胞分裂过程进行跟踪观察并作染色体核型分析，结果表明，牛心朴子 的染色体数 目为2n=2x=24，染色体为二倍体，全组染色体总长度为51．75i,zm，核型公式为2n=24=24m，有 1个随 体 ，其染色体核型属于对称的1A型。 关键词：牛心朴子；染色体；核型分析 中图分类号：Q942．4 文献标志码：A 文章编号：1002—1302(2012)06—0352—02 牛心朴子(Cynanchumkomarovii)为多年生直立或半直立 1．3．3 材料的固定 取出材料于POB中预处理3h，转入卡 丛生草本植物，广泛生长在次生沙漠中的半固定沙丘和荒漠 诺固定液中。 流沙区，在我国内蒙古、宁夏、甘肃等地均有分布 。牛心朴 1．3．4 材料的解离与染色 取 出1个根尖放入 1mol／L 子喜光、极耐旱、耐高温，是在沙化进程中适应环境而保存下 HC1：95％乙醇 = 1：1的溶液 中，60℃恒温解离 l4— 15min -s]然后在蒸馏水中漂洗 3次，切取根尖前端0．5mm 来的沙漠生态型植物，是草原逆行演替过程中最后阶段的指 ， 示植物。近年来随着草地沙化面积的扩展，牛心朴子种群现 处，加 1滴卡宝品红染液，盖上盖玻片，染色 10rain左右。 已广泛分布到干旱草原和荒漠草原地区，在沙化严重的地段， 13．5 制片 用镊子、解剖针等将染好的材料弄碎，使细胞 牛心朴子已成为醒 目的暗绿色背景 ，牛心朴子的出现是草 均匀分散于载玻片上，然后盖上盖玻片，用解剖针的一端轻轻 场沙质荒漠化退化的标志 。目前对牛心朴子的研究主要 敲打，使细胞破碎。 集中在其组成成分、理化功能和抗旱生理方面，已有大量文献 1．3．6 镜检和永久制片 把制好的片子放在显微镜下观察， 报道，而对其细胞生物学特性等方面则鲜有报道。本研究重 先用低倍镜找到细胞 ，然后在 OlympusBH一2型光学显微镜 点对牛心朴子细胞分裂过程中的染色体行为进行跟踪观察， 下观察并摄影 ，对于好的片子采用永久制片，以便很好地保 并作染色体核型分析，为牛心朴子细胞学研究奠定基础。 存。永久玻片的制作方法：将制成的临时玻片放到液氮或冰 箱的冷冻室内低温处理 ，然后用刀片将盖玻片轻轻撬开 ，接着 1 材料与方法 将盖玻片和载玻片同时放入 37℃的烘箱中烘干或防尘自然 1．1 供试材料 干燥 ，然后用二甲苯透明(即用二甲苯浸泡数分钟)，中性树 供试材料为野生牛心朴子种子萌发植株的幼嫩根尖。 胶封片 。涂胶时将树胶均匀涂开，以避免产生气泡 一 。 1．2 试 剂 1．3．7 染色体计数 在显微镜下观察统计细胞染色体数 目， 对二氯苯(POB)：称取5g对二氯苯固体于棕色瓶中，加 方法是在镜下找到中期染色体清晰的细胞，边观察边画简图， 入 100mL40～45℃蒸馏水，振摇5min，静止 1h。卡诺固定 将 1个细胞内染色体划分成几个 自然分散区组，便于计数，统 液 ：95％乙醇和冰醋酸，按3：1的比例配制。卡宝品红染液： 计染色体数 目。 原液A，称取3g碱性品红结晶溶于100mL70％乙醇中；原液 1．3．8 染色体的拍照 选取5一lO个染色体分散 良好的中 B，取 1