第六章微生物的生长和环境条件选编.ppt

第六章 微生物的生长和环境条件;通过本章的学习，要求掌握： 1、微生物生长量的测定方式。 2、细菌纯培养生长曲线各个时期的主要特点。 3、物理、化学手段用于控制微生物生长的方法及原理。 重点： 细菌纯培养生长曲线。 难点： 如何利用细菌纯培养生长曲线的对数生长期来计算细菌的代时和代数。;第一节 微生物生长的测定;个体生长;二、 微生物分离和纯培养;1、稀释倒平板法;3、平板划线分离法;4、选择培养基分离法;利用选择培养基分离 根据所要分离的菌种的特性选用培养基： ①分离真菌用马丁氏培养基，pH偏酸；分离放线菌用高氏1号，pH中性偏碱。 ②根据不同菌对化学试剂的敏感性：分离放线菌，培养基中加10%酚，抑制细菌、真菌；从土壤中分离真菌，加链霉素，抑制细菌生长。 ③根据分离对象的营养特征：分离能发酵纤维素的菌株，培养基以纤维素为???一碳源。分离固氮菌，用无氮培养基。分离厌氧菌，可以消除培养基中的氧气;5、单细胞挑取法;三、 微生物生长的测定;目镜测微尺;细胞总数测量;2、比浊法;活菌数测量;2、最大概率数法(most probable number, MPN);3、浓缩法（滤膜法）;细胞生物量测量;第二节 微生物的群体生长;生长曲线的制作;一条典型的生长曲线至少可以分为 延滞期，对数期，稳定期和衰亡期等四个生长时期;细菌数量不增加或增加很少，代谢活跃； 细胞内的代谢活力强，特别是合成一些必需的酶类； 细胞内RNA，尤其是rRNA的含量很高，细胞的嗜碱性强； 细胞体积增大，拉长； 抗性有所降低，对不良环境因素表现很敏感。;影响延滞期长短的因素： 菌种：繁殖速度较快的菌种的延滞期一般较短 接种物菌龄：“种子”所处的生长曲线上的阶段 接种量：接种量增大可缩短甚至消除延滞期 培养基成分：营养成分及其变化影响延滞期 ;（二）对数期 （ log phase ） ;繁殖代数（n） ;例如：在一细菌培养液中第一次测得的细菌数为 104 /ml，经过培养 4 h后，又测得菌液中的细菌数为 108 /ml，求此菌的世代时间和在此时间内繁殖的代数。 根据公式：G = （t2 - t1 ）/3.3 · lg (x2 /x1) t2 - t1 = （4 - 0）× 60 min = 240 min x2 = 108 x1 = 104 lg(x2 /x1 ) = lg108 - lg104 = 8 - 4 = 4 代入上式 G = 240/3.3 × 4 = 240/13.2 = 18 min 即在上述培养液中，世代时间为 18 min。 细菌繁殖代数 n = (t2 - t1)/G = 240/18 = 13.3 繁代。;影响对数期微生物代时的因素： 菌种：不同菌种的代时差别极大 营养成分：同一种细菌在营养丰富的培养基中生长，代时较短 营养物浓度：影响微生物 的生长速率和总生长量 培养温度;（三）稳定期 （ stationary phase ） ;稳定期到来的主要原因： 营养物尤其是生长限制因子的消耗 营养物的比例失调，例如C/N的比值不合适 酸、醇、毒素或H2O2等有害代谢产物的积累 pH、氧化还原势等物化条件越来越不适宜;（四）衰亡期 （ decline phase ） ;二、 同步培养;同步培养方法 ;Helmstetter-Cummings 法;细菌的同步生长和非同步生长;三、 细胞的生长周期;第三节 环境条件对微生物生长和代谢的影响; 化疗(chemotherapy) 是指利用具有选择性的化学物质如磺胺、抗生素等对生物体内部被微生物感染的组织或病变细胞进行治疗，以杀死组织内的病原微生物或病变细胞，但对机体本身无毒害作用的治疗措施。;灭菌（sterilization) 是指用物理或化学因子，杀灭物体中的所有活微生物，包括最耐热的细菌芽孢。 ;防腐(antisepsis) 在某些化学物质或物理因子作用下，能防止或抑制微生物生长的一种措施，它能防止食品腐败或防止其它物质霉变。 ;消毒(disinfection) 消毒是指杀死或消除所有的病原微生物，可以起到防止感染或传播的作用。但不能杀死所有的芽孢。 ;;一、 温度;极端嗜热菌;微生物生长的温度类型;低温保藏菌种就是利用这个原理。 1）一些细菌、酵母菌和霉菌的琼脂斜面菌种通常可以长时间地保藏在4℃的冰箱中； 2）-20℃、-70℃和液氮保藏（-196℃）。;利用高温灭菌的方法;蛋白质含水（%）;干热灭菌;巴斯德