丁二酸酐修饰对枯草芽孢杆菌氨肽酶结构及酶学特性的影响.pdfVIP

丁二酸酐修饰对枯草芽孢杆菌氨肽酶结构? 及酶学特性的影响? 张 静 ．? 田 亚平? ?江 南大 学 丁 业 生 物技 术 教 育部 重 点 实验 室 ，江 苏 尤 锡 ???????? 摘 要 ：采 用丁二 酸 酐 ????对 经硫 酸铵 盐析 和截 留相 对 分子 质量 ??????的超 滤膜 分 离提 取 后 的? 氨 肽 酶 ????在优 化条件 下进 行化 学修 饰 ，??对 ??的平均氨 基修 饰 率为 ??．??％，酶 活保 留率 为? ???．??％：修 饰后 的氨 肽酶 紫 外吸 收光谱 发 生一 定红 移 ，圆二 色谱 分析 其二 级 结构 中无规 卷 曲 比? 例 有 一定 的增加 ，? 螺旋 、?折 叠 以及? 转 角的含 量有 所 下 降 ，说 明修饰 后 的氨 肽 酶 空间构 象有? 一 定改 变 ：修饰 后 的氨 肽 酶 。??℃保 温 ???后 仍 然 能保 留 ??％以上 的 活性 ，与修 饰 前 同等 条 件 下? 酶 活残 留 ??％相 比 。其 热稳 定性 显著提 高。修 饰后 的氨 肽 酶动 力 学参 数? 从 ?．??????／?降低 到? ?．???????／?，表 明其 对底 物 的亲 和 力有 明显 的提 高 。此外 ，修 饰 后 的氨肽 酶 最适 温度 和 最适 ??? 值也 有一 定 的 变化 。结 果表 明 ??化 学修饰 是 一种 可 明显提 高枯 草 芽孢杆 菌氨 肽 酶 与底物 的 亲? 和 力及 其热稳 定性 的有 效方 法 。? 关键 词 ：氨 肽酶 ；丁??? 酸 酐 ；化 学修 饰 ；稳 定性 ；动力 学? 中图分类号 ：????? 文献标志码 ：?? 文章编号 ：????— ????????????— ????一??? ?????????? ??????????????????????????????????????????????????????????????? ??????????????????????? ?????????????