HPLC法测定复方灵芝颗粒中五味子甲素的含量的论文.docVIP

　　HPLC法测定复方灵芝颗粒中五味子甲素的含量的论文 【关键词】 复方灵芝颗粒 摘要:目的 建立复方灵芝颗粒中五味子甲素含量测定的方法。方法 用高效液相色谱法测定，色谱条件为：c18柱，(5 μm,250×4.6 mm)，流动相为甲醇水（体积比75∶25），检测波长为254 nm。结果 五味子甲素在0.1608～6.432 μg范围内呈现良好的线性关系（r=09996），平均加样回收率为99.27％，rsd=1.02%（n＝6）。结论 该法操作简便、准确，重复性好，建立的定量方法可用于复方灵芝颗粒质量的控制。 　　关键词:hplc；复方灵芝颗粒；五味子甲素 　　abstract: objiective to establish a method for the content determination of deoxyschizandrin in plex lingzhi granule. methods hplc ed on an ods-c18 column (5μm,250 mm×4.6 mm) using methanolobile phase under the detection . results the linear range of deoxyschizandrin ean recovery ethod is simple,reproducible and accurate for the content determination of deoxyschizandrin in plex lingzhi granule. 　　key erck公司出品）；双蒸馏水（自制），其他试剂为分析纯。五味子甲素标准对照品购于中国药品生物制品检定所（供含量测定用，批号为110764-200107），复方灵芝颗粒（自制，批号2005020220050204）。 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件的选择 　　色谱柱:inertsil (c18,5 μm,250 mm×4.6 mm)；检测波长：254 nm；流动相：甲醇-水（75∶25）,流速：1 ml#12539;min-1；进样量10 μl；柱温：30 ℃。取一定浓度样品进行测定，此条件下所测五味子甲素与样品中其他组分色谱峰完全分离，色谱峰形对称而尖锐（拖尾因子t＝1.00），按五味子甲素峰计算，理论板数不小于2000。 　　2.2 阴性对照试验 　　取处方量以相同工艺制备的阴性对照（缺五味子），按上述方法测定，结果为：阴性对照色谱图中在与五味子甲素对照品色谱图相对应的保留时间处无色谱峰出现，结果表明阴性对照（含灵芝、柴胡和郁金三味药材）用相同制备方法下提取的成分在测定波长处无吸收，故其他成分其他对五味子甲素测定无干扰，见图1。 　　2.3 样品溶液制备 　　2.3.1 对照品溶液的制备 　　取五味子甲素对照品1005 mg，精密称定，置25 ml量瓶中，加甲醇溶解后稀释至刻度,摇匀，精密量取1 ml，置10 ml量瓶中加甲醇稀释至刻度，作为对照品溶液(40.2 μg#12539;ml-1)。 　2.3.2 供试品溶液的制备 　　取本品约4 g，研细，精密称定，置100 ml锥形瓶中，加氯仿约40 ml，超声处理30 min，滤过，残渣加氯仿30 ml，超声处理30 min，滤过，合并两次滤液，将容器和滤纸多次洗涤液并入滤液中，挥干,残渣加甲醇溶解并转移置10 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.45 μm微孔滤膜滤过,取续滤液作为供试品溶液。 　　2.4 线性关系考察 　　精密吸取五味子甲素对照品贮备液 (0.402 mg#12539;ml-1) 0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 ml，置5 ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，分别取上述对照品溶液各10 μl进样，按上述色谱条件测定，以峰面积(a)为纵坐标，进样量(m)为横坐标，进行线性回归，得回归方程a=1 194 733m＋59 047，r=0.999 6。其线性范围为0.402～6.432 μg，结果表明在此范围内呈良好的线性关系。 　　2.5 精密度试验 　　取上述对照品溶液10 μl，重复进样6次，测定，其rsd=0.75%（n=6）。 　　2.6 稳定性试验 　　取上述对照品溶液10 μl，分别在0、2、4、6、8、12 h进样测定，其rsd=0.98%（n=6）,表明样品在12 h以内是稳定的。 　　2.7 重复性试验 　　取供试品（批号6份，每份约4 g，按“23”项下方法制备并测定，测出五味子甲素平均含量为15.3 mg#12539;g-1，rsd=1.21%（n=6）。