广州大学硕士研究生市政工程毕业答辩模板二浅析.ppt

广东省自然科学基金（S2012040007855）； 深圳市科技计划（JCYJ20120617141700417）;紫外灭活隐孢子虫的试验II (浸入方式);1.1.1 研究背景; 隐孢子虫是一种可致病的寄生性原生动物，感染性很强，宿主受感染后易引发发烧、腹痛、腹泻多种临床症状，严重者甚至引发死亡。 ; ;1.2 隐孢子虫灭活的国内外研究现状;1.3 研究的目的与意义;紫外灭活隐孢子虫的试验II (浸入方式);2.1 实验所需主要器材与设备;离心机;;（1）戊二醛固定30min （2）Hanks溶液清洗 3 次 （3）乙醇梯度脱水 （4）用纯醋酸异戊酯置换 （5）进行冷冻干燥 （6）镀金并进行扫描电镜观察 ; 利用型号为Nanodrop 2000的超微量分光光度计，检测体系中溶解蛋白的浓度。蛋白质分子中的酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基使其在280 nm处具有紫外吸收, 其吸光度与蛋白质含量成正比。;;紫外灭活隐孢子虫的试验II (浸入方式);1—紫外灯管；2—锡纸；3—培养皿；4— 转子； 5—变温式磁力搅拌器；6—铁架 台；7—防紫外线挡板；;图1 PH值对隐孢子虫灭活率的影响;图(a) ρ(HCO3-)对隐孢子虫灭活率的影响;1—水浴槽；2—玻璃管；3—紫外灯；4—转子；5—可控温式磁力搅拌器；6—铁架台； 7—防紫外线挡板； ;图1 PH值对隐孢子虫灭活率的影响;图(d)ρ(CO32-)对隐孢子虫灭活率的影响; 紫外与超声协同灭活隐孢子虫分三种情况：（1）先UV后US；（2）先US再UV；（3）UV耦合（同时）US。 试验将14W紫外灯分别与（150W, 20kHz）、（100W，200kHz) 两种超声发生器联合作用，采用紫外灯浸没的方式进行协同灭活的研究。;图1 US (150W, 20kHz)协同UV 灭活试验结果;图2 温度对隐孢子虫灭活率的影响;图(d) Ag+ 对US耦合UV灭活隐孢子虫的影响;A. UV灭活隐孢子虫的机理; ;图1 UV耦合US作用下扫描电镜与溶解蛋白的组合图; 图1 耦合处理后隐孢子虫 基因组DNA电泳图谱;紫外灭活隐孢子虫的试验II (浸入方式);1.研究单一紫外（模拟平行光方式与浸入方式）对隐孢子虫的灭活，发现灭活率随温度的升高成非线性增加，相同灭活时间下，灭活率随着浊度的增加而减小，且灭活率随HA浓度的增加而下降。HCO3-、SO42-、Cl-对灭活率影响都不太明显，Mn2+、Fe3+对紫外线灭活隐孢子虫有拮抗作用，而Ag+对紫外线灭活隐孢子虫起协同作用。 2.在研究利用紫外协同超声灭活隐孢子虫的过程中，发现紫外耦合（同时）超声方式是各种组合方式下灭活率是最高的。pH值对耦合作用下灭活率影响不大。提高水温可促进灭活。浊度与HA均可抑制耦合作用下的灭活作用。Cl-对灭活率影响不大；CO32-与Fe3+浓度会引起灭活率降低；Ag+能够促进灭活。 ; 3.机理研究过程中，通过SEM观察、溶解蛋白实验和琼脂糖凝胶电泳检测发现：（1）在长时间UV辐照下，一方面是紫外损伤隐孢子虫核酸，另一方面隐孢子虫的表面结构受到损害。（2）而对于UV耦合US来灭活隐孢子虫的，在进上述试验后发隐孢子虫因超声空化作用表面结构遭到破坏，同时隐孢子的DNA因受到紫外辐照有一定的损伤。 ; （1）本研究采用的是低压低功率的紫外灯，效果不够理想，可进一步开展中高压以及大功率紫外灯对隐孢子虫的灭活研究。 （2）紫外耦合超声比单一紫外作用更具实用价值，是未来研究的一个方向。 （3）受研究时间限制，本研究只探讨了紫外耦合超生的灭活效果，而紫外与其他消毒技术（压力、化学、热作用等）联用灭活隐孢子虫的效果，也???得深入的探讨与研究。; 敬请各位专家和老师批评指正 谢谢大家！