基于金纳米粒子自组装的分光光度法测定半胱氨酸.pdfVIP

第 34 卷 分析化学 FENXIHUAXUE 研究简报 第 8 期 2006 年 8 月 ChineseJoUrnaIofAnaIyticaIChemistry 1149 ~1152 基于金纳米粒子自组装的分光光度法测定半眺氨酸 李正平＊ 段新瑞 白玉惠 河北大学化学与环境科学学院 保定 071002 + 摘 要 在 pH4.56 的 Britton-robinson B-r 缓冲溶液中 半肌氨酸的 SH 和 NH3 分别与金纳米粒子 表面进行共价结合和静电作用 导致金纳米粒子的长距离自组装 形成网状超分子结构 并使金纳米粒子的最 大吸收波长从 520 nm红移到 660 nm 本实验对半肌氨酸引导的金纳米粒子自组装的作用机制进行了研究 建立了操作简便 高灵敏度测定半肌氨酸的分析方法 其线性范围为 0.01 ~0.20 mg/L 检出限为 2.8 Pg/L 3 2.3 X10 -8 moI/L 在实验条件下 其它常见的氨基酸和谷肌甘肽均不干扰测定 关键词 分光光度法 金纳米粒子 半肌氨酸 1 引 言 在组成蛋白质的氨基酸中 半肌氨酸是唯一具有琉基的氨基酸 它在生物体内参与细胞的还原过程 及蛋白质 谷肌甘肽的合成 具有保护细胞免受毒物损害等功能 半肌氨酸的代谢失调会导致肌氨酸病 等疾病的发生 半肌氨酸的分析对生物化学研究及临床诊断都有重要的意义 有关半肌氨酸分析方法 的报道 有分光光度法 1 荧光分析法 2 电化学分析法 3 化学发光分析法 4 高效液相色谱法 5 及毛 细管区带电泳法 6 这些方法都基于半肌氨酸的衍生反应及氧化还原反应 近年来 基于生物分子参 与的纳米粒子自组装所引起的颜色变化在生化分析中的应用已成为一个十分活跃的研究领域 7 特别 是在 DNA杂交分析 8 及免疫 9 分析中的应用 Zhong等 10 报道金纳米粒子与半肌氨酸相互作用后发 生聚集 使金纳米粒子的最大吸收波长发生红移 并由此研究了半肌氨酸的分析测定 本实验发现 在 合适的实验条件下 半肌氨酸能引导金纳米粒子发生有效的长距离自组装 使金纳米粒子的最大吸收波 长发生更大的红移 由此建立了半肌氨酸的分光光度分析方法 其灵敏度比 Zhong的方法至少提高了一 个数量级 并且具有良好的选择性 2 实验部分 2.1 仪器与试剂 TU-1901 紫外可见分光光度计 北京普析通用仪器有限责任公司 JEM-1200EXI 透射电子显微 镜 日本 JeoI公司 PHS-3C数显 pH计 上海伟业仪器厂 AG245 电子天平 瑞士 MetIerToIedo公 司 OL-901 涡旋混合器 江苏海门市旗磷医用仪器厂 L-半肌氨酸 北京化工厂 氯金酸 AUCI3 HCI 4H2 0国药集团化学试剂有限公司 上海 L-肌 氨酸 北京市欣经科生物技术公司 半肌氨酸配制成 100 mg/L储备液 于 4 C冰箱中保存并且每天更 新 半肌氨酸工作液由储备液逐级稀释得到