液相色谱柱使用问题排查指南.PDFVIP

[ 常见提问与解答 ] 液相色谱柱 使用问题排查指南 Q1: 新柱柱效测试，为何塔板数明显偏低？ A: n 确保系统状态正常，如有必要再冲洗一次。 n 柱效受系统死体积扩散影响。沃特世(Waters?)色谱柱出厂测试是在体积最小化的系统上进行，塔板数较高。通常自测如 能达到70%以上，就可以接受。 n 色谱柱体积越小，系统死体积(管路、检测器流通池)对柱效的影响就越大。对于小内径色谱柱(2.1和3 mmid)、和/或短的 色谱柱(≤10cm)，尽可能减少系统死体积(管路长度/内径、流通池)，并仔细检查管路与色谱柱的连接。检测器采样频率 应设置为20 Hz。 n 用什么条件和什么样品测试的？峰保留时间越短，越容易受系统死体积影响。建议调整流动相条件，使峰保留时间在10分钟 (常规HPLC系统)或5分钟(UHPLC系统)。 n 样品进样体积越大，样品溶剂会导致峰扩散。HPLC柱可进样1 μL，UPLC柱可进样0.1 μL。 Q2: 新柱上机，基线一直不能平衡，怎么办？ A: n 首先断开检测器，按照对色谱柱