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生物选修1:4.3酵母细胞的固定化
课题3 酵母细胞的固定化;酶制剂存在的缺陷:
1、通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感,容易失活;
2、溶液中的酶很难回收,不能被再次利用,提高了生产成本;
3、反应后会混在产物中,可能影响产品质量。; 如果你是工程技术人员,你如何解决这个问题?;一、固定化酶的应用实例;1、固定化酶技术。即将酶固定在一定空间内的技术(如固定在不溶于水的载体上)。;3、高果糖浆是果糖含量为42%左右的糖浆。作为蔗糖的替代品,高果糖浆不会像蔗糖那样诱发肥胖、糖尿病、龋齿和心血管病,对人的健康有利。
; 固定化酶技术生产高果糖浆的图示:;反应柱能连续使用半年,大大降低了生产成本,提高果糖的产量和质量。;练习:;2、研究认为,用固定化酶技术处理污染物是很有前途的。如将从大肠杆菌得到的磷酸三酯酶固定到尼龙膜上制成制剂,可以用来降解残留在土壤中的有机磷农药,与用微生物降解相比,其作用不需要适宜的( )
A、温度 B、PH
C、水分 D、营养;3、目前,日用化工厂大量生产的酶制剂,其中的酶大都来自
A、化学合成
B、动物体内
C、植物体内
D、微生物体内 ;在生产实际中使用固定化酶技术有无不足?如有不足,怎么办?;二、固定化细胞技术;将酶或细胞固定化的方法?;练习:
1.使用固定化细胞的优点是( )。
A.能催化大分子物质的水解
B.可催化一系列化学反应
C.与反应物易接近
D.有利于酶在细胞外发挥作用;2.酶的固定方法不包括( )。
A. 将酶吸附在固体表面上 B.将酶相互连接起来
C.将酶包埋在细微网格里 D.将酶制成固体酶制剂,如加酶洗衣粉中的酶;3、如果反应物是大分子物质,采用那种方法催化受限制( )。
A.直接使用酶
B.使用化学方法结合的酶
C.使用固定化细胞
D.使用物理吸附法固定的酶;4、下列关于酶和细胞的固定叙述不正确的是( )。
A.酶分子很小,易采用包埋法
B.酶分子很小,易采用化学结合或物理吸附法固定的酶
C.细胞个大,难被吸附或结合
D.细胞易采用包埋法固定;5.图中所示的酶固定化技术中属于包埋法的一组是 ( )
A.①② B.①③④ C.①④ D.③④;;;三、实验操作;1、酵母细胞的活化;活化:
让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态;
本质:
加快新陈代谢;
方法:
加入适量的水。
;取1g干酵母,放入50ml的小烧杯中,加入蒸馏水10ml,用玻璃棒搅拌,使酵母细胞混合均匀,成糊状,放置1h左右使其活化;思考:
你认为酵母的活化操作有哪些注意事项?
1、所用容器要大一些;
2、要保证酵母菌的活性;
;2、配制物质的量浓度为0.05mol/L的CaCl2溶液;3、配制海藻酸钠溶液; 加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环,涉及到实验的成败,一定要按照教材的提示进行操作。海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量。如果海藻酸钠浓度过高,将很难形成凝胶珠;如果浓度过低,形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少,影响实验效果。;4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合;5、固定化酵母细胞; 刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间,以便形成稳定的结构。
检验凝胶珠的质量是否合格,可以使用下列方法:
一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压,如果凝胶珠不容易破裂,没有液体流出,就表明凝胶珠的制作成功。
二是在实验桌上用力摔打凝胶珠,如果凝胶珠很容易弹起,也能表明制备的凝胶珠是成功的。;这一阶段成功与否呢?怎样评价?;(二)用固定化细胞发酵;这一阶段成功与否呢?怎样评价?;练习:;2、下列叙述不正确的是( )
A、从操作角度来考虑,固定化细胞比固定化酶容易
B、固定化细胞比固定化酶对酶的活性影响更小
C、固定化细胞固定的是一种酶
D、将微生物的发酵过程变成连续的酶反应应选择固定化细胞技术
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