高效液相色谱法测定复方元胡止痛片中丹皮酚的含量的论文.docVIP

　　高效液相色谱法测定复方元胡止痛片中丹皮酚的含量的论文 作者：丁永志,李霄锋,叶新友,蔡俊安 【摘要】 目的 采用hplc法测定复方元胡止痛片中丹皮酚的含量。方法 采用外标一点法,hypersil bds c18柱,甲醇-水(1∶1)为流动相,流速为1.0 ml/min,λ＝274 nm。结果 丹皮酚在0.103～0.824 μg范围内呈良好线性,回归方程为：y＝5 043.774 9x＋275.591 5,r＝0.999 7,平均加样回收率98.59%,rsd＝0.68%(n＝6)。结论 方法简便、准确,专属性强,测定结果重复性好,为复方元胡止痛片中丹皮酚的定量分析提供了科学有效的方法。 【关键词】 复方元胡止痛片；丹皮酚；高效液相色谱法；含量测定 abstract：objective to establish the method for detemining the content of paeonolum in fufang yuanhu zhitong pian by hplc. methods hypersil bds c18 column ethyl alcohol-obile phase, detection , and flol/min. results the calibration curve , and linear equation ethod ple, accurate and proper, ethod of paeonolum in fufang yuanhu zhitong pian and the repeatability ；hplc；content determination 复方元胡止痛片收载于《卫生部药品标准·中药成方制剂》(第7册),功能疏气止痛,用于肝胃气痛、胃脘胀痛、胸肋痛、月经痛。.处方由延胡索(醋制)、徐长卿、香附(醋制)、川楝子组成[1]。原标准中只有鉴别项检查,没有含量控制项。为了更好地控制复方元胡止痛片的质量,我们对复方元胡止痛片处方进行了分析,发现延胡索、徐长卿在整个处方中作用最大。复方元胡止痛片中延胡索的含量测定多有报道,而对徐长卿进行研究的较少。徐长卿中有效药理活性成分为丹皮酚,故我们以徐长卿中丹皮酚的含量为指标,采用高效液相色谱(hplc)法测定丹皮酚含量,为复方元胡止痛片中丹皮酚的定量分析提供有效方法。 　　1 仪器与试药 高效液相色谱仪：spd-10a日本岛津；紫外分光仪：上海康化生化仪器制造厂；超声波清洗器：sk3200h上海科导超声仪器有限公司。丹皮酚对照品(批号0708-9704,供含量测定用),中国药品生物制品检定所提供；复方元胡止痛片(批20050202,河南百年康鑫药业有限公司提供。其他试剂均为分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件 hypersil bds c18色谱柱(4.6 mm×200 mm,5 μm)；流动相：甲醇-水(1∶1),流速1.0 ml/min；检测波长274 nm；分离度大于1.5,理论塔板数按丹皮酚峰计不少于2 000[2]。色谱图见图1。 　　2.2 溶液的制备 　　2.2.1 对照品溶液的制备 　　取丹皮酚对照品适量,用甲醇溶解,制成每1 ml含丹皮酚40 μg的溶液。 　　2.2.2 供试品溶液的制备 　　取供试品10片,精密称定,研细,取约0.5 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入25 ml甲醇,称定重量,超声处理(功率135 in,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。 　　2.2.3 阴性对照品溶液的制备 　　依据处方中的比例,按制法制备缺徐长卿的阴性对照样品,按供试品溶液的制备方法制备阴性对照品溶液。 　　2.3 线性关系的考察 精密称取丹皮酚适量,用甲醇溶解,制成每1 ml含丹皮酚40 μg的溶液。分别进样2.5、5.0、10.0、15.0、20.0 μl,测定峰面积,以峰面积积分值为纵坐标、丹皮酚的进样量为横坐标绘制标准曲线,计算,得回归方程：y＝5 043.774 9x＋275.591 5,r＝0.999 7(n＝5),表明丹皮酚在0.103～0.824 μg之间呈良好的线性关系。 　　2.4 精密度试验 取同一批号供试品(批研细,称取0.5 g,按照供试品溶液制备方法制得供试品溶液,进样量10 μl,连续进样6次,记录峰面积,结果rsd＝0.32%,表明精密度良好。 　　2.5 重复性试验 取同一供试品(批,按照上述色谱条件,连续测定5次,测定每份样品中丹皮酚含量,结果rsd＝1.56%,表明重复性良好。 　　2.6 稳定性试验 取同一供试品溶液