高效液相色谱法测定感冒清热颗粒中5.docVIP

　　高效液相色谱法测定感冒清热颗粒中5 【摘要】 目的 测定感冒清热颗粒中5-0-甲基维斯阿米醇苷的含量。方法 采用高效液相色谱法,hypersil c18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)；甲醇-水(44∶56)为流动相；流速1.0 ml/min；检测波长：292 nm。结果 5-0-甲基维斯阿米醇苷在0.092 2～0.922 μg范围呈良好的线性关系(r＝0.999 9),平均回收率为97.9%,rsd＝0.71%(n＝6)。结论 本测定方法简便、准确、重复性好,可用于感冒清热颗粒质量控制。 【关键词】 感冒清热颗粒；5-0-甲基维斯阿米醇苷；高效液相色谱法；含量测定 abstract：objective to establish a method for determining the content of 4’-o-β-d-glucosyl-5-o- methylvisamminol in ganmao qingre granule by hplc. method the seperation ed in hypersil c18 colunm (4.6 mm×250 mm, 5 μm) obile phase of methanol-l/min and the . results the calibration curves l for 4’-o-β-d-glucosyl-5-o-methylvisamminol (r＝0.999 9). the average recovery ethod is simple, reproducible and can be used for the quality control of ganmao qingre granule. 　　key ao qingre granule；4’-o-β-d-glucosyl-5-o-methylvisamminol；hplc；content determination 感冒清热颗粒收载于2005年版《中华人民共和国药典》 (一部),由荆芥穗、防风、柴胡、葛根等11味药材组成,具有疏风散寒、解表清热功效,临床用于风寒感冒所见的头痛发热、恶寒身痛、鼻流清涕、咳嗽咽干等症。.原标准有测定葛根中葛根素含量的方法[1]。为提升感冒清热颗粒的质量控制标准,保证临床疗效的稳定,本试验建立以高效液相色谱法测定其中主药防风的有效成分5-0-甲基维斯阿米醇苷含量的方法。 　　1 仪器与试药 日本岛津lc-10at vp高效液相色谱仪,spd-10at型紫外检测器,class-vp v5.02色谱工作站,cqx25-06超声清洗仪。感冒清热颗粒(批200606062006062220060813)及阴性样品,由广西某药业有限公司提供；5-o-甲基维斯阿米醇苷对照品由中国药品生物制品检定所提供(批号1523-200203)。甲醇为色谱纯,水为超纯水,其他试剂均为分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 测定波长的选择 5-o-甲基维斯阿米醇苷对照品溶液经紫外分光光度计扫描,在291.8 nm处有最大吸收峰,故选择292 nm为测定波长。 　　2.2 色谱条件 色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱(hypersil c18 ,4.6 mm×250 mm,5 μm)；流动相：甲醇-水(44∶56)；检测波长为292 nm；流速：1.0 ml/min；柱温：室温。 　　2.3 系统适用性试验 分别吸取5-o-甲基维斯阿米醇苷对照品溶液、阴性样品溶液和供试品溶液各20 μl,注入液相色谱仪,得色谱图(见图1)。试验结果表明,供试品和对照品溶液有一保留时间相同的色谱峰,并且阴性样品在5-o-甲基维斯阿米醇苷峰附近无干扰,5-o-甲基维斯阿米醇苷与其它组分达到基线分离。分析时间适宜,理论板数定为不低于5 000。 　　2.4 对照品溶液的制备 精密称取5-o-甲基维斯阿米醇苷对照品适量,置棕色容量瓶中,加50%甲醇制成每1 ml含20 μg的溶液,即得。 　　2.5 供试品溶液的制备 取装量差异项下的本品内容物,研细,取约4 g,精密称定,加甲醇50 ml,超声处理(功率250 l续滤液,蒸干,残渣加水20 ml分次充分溶解,转移至分液漏斗中,用水饱和的正丁醇提取3次,每次20 ml。合并正丁醇液,用正丁醇饱和的氨试液洗涤3次,每次10 ml。分取正丁醇液,置水浴上蒸干,残渣用50%甲醇分次溶解,转移到10 ml量瓶中,加50%甲醇至刻度,摇匀,滤过,即得。 　　2.6 阴性样品溶液的制备 取阴性样品,照“2.5”项下方法制备,即得。 　　2.7 线性关系考察 精密称取5-o-