高效液相色谱法测定淫黄胶囊中淫羊藿苷的含量的论文.docVIP

　　高效液相色谱法测定淫黄胶囊中淫羊藿苷的含量的论文 【摘要】 目的 建立淫黄胶囊中淫羊藿苷的含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法。色谱柱为zorbax sb-c18 (250 mm×4.6 mm,5 μm)；流动相为乙腈-水(25︰75,v/v),流速1.0 ml/min；检测波长270 nm。结果 淫羊藿苷的进样量与其峰面积积分值在0.099 84～0.599 04 μg范围内有良好的线性关系(r＝0.999 8),平均加样回收率为97.77%,rsd＝1.77%(n＝6)。结论 本法简便可行,准确可靠,可用于淫黄胶囊中淫羊藿苷的含量测定。 【关键词】 淫羊藿苷；淫黄胶囊；高效液相色谱法 　　abstract：objective to establish an hplc method for determination of the content of icariin in yinhuang capsules. methods the hplc assay ed on a zorbax sb-c18 column (250 mm×4.6 mm, 5 μm) obile phase of acetonitrile-aquous (25︰75, v/v) at a flol/min, and the detective . results a good linearity of icariin ethod is simple, feasible, accurate and reliable. it can be applied to the determination of icariin in yinhuang capsules. 　　key m×4.6 mm,5 μm)；流动相：乙腈-水(25︰75,v/v)；流速：1.0 ml/min；检测波长：270 nm。理论塔板数按淫羊藿苷计算不低于2 500。 　　2.2 检测波长的确定 　　取淫羊藿苷对照品适量,用50%乙醇溶解、稀释成浓度约为1 mg/ml的溶液,以50%乙醇为空白,在400～200 nm波长范围内扫描,结果淫羊藿苷在270 nm波长处有最大吸收。 　　2.3 标准曲线的制备 　　精密称取淫羊藿苷对照品10.40 mg,置50 ml量瓶中,加50%乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀,得浓度为208.0 μg/ml的对照品储备液。分别从中精密吸取0.6、1.2、1.8、2.4、3.0、3.6 ml置于25 ml量瓶中,加50%乙醇稀释至刻度,摇匀,得系列浓度的对照品溶液。分别精密吸取各浓度对照品溶液20 μl,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以淫羊藿苷进样量为横坐标,以峰面积积分值为纵坐标,进行线性回归,得回归方程为：y＝－5.953＋2 107.944x,r＝0.999 8。结果表明,淫羊藿苷进样量在0.099 84～0.599 04 μg范围内与其峰面积积分值有良好的线性关系。 　　2.4 供试品溶液的制备 　　取淫黄胶囊10粒内容物,研细,取细粉约0.2 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入50%乙醇20 ml,称定重量,超声处理(功率200 in,放置,冷至室温,称定重量,用50%乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液4 ml置水浴上蒸干,加水10 ml溶解,以乙酸乙酯萃取3次,每次10 ml,合并乙酸乙酯萃取液,减压回收溶剂至干,残渣加50%乙醇溶解并定容至25 ml量瓶中,摇匀,即得供试品溶液。 　　2.5 阴性干扰试验 　　按处方制法制备缺淫羊藿的阴性对照样品,按供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液。分别吸取淫羊藿苷对照品溶液(14.976 μg/ml)、供试品溶液、阴性对照溶液各20 μl,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定,记录色谱图(见图1)。结果表明,在淫羊藿苷色谱峰位置处阴性无干扰。 　　2.6 精密度试验 　　精密吸取淫羊藿苷对照品溶液(14.976 μg/ml)20 μl,注入液相色谱仪,重复进样5次。结果峰面积积分值rsd＝1.03%,表明精密度良好。 　　2.7 稳定性试验 　　取同一份供试品溶液(批,分别于0、2、4、6、8 h时进样20 μl,按上述色谱条件测定,峰面积积分值rsd＝1.39%。结果表明,供试品溶液中淫羊藿苷至少在8 h内稳定性良好。 　　2.8 重复性试验 　　取同一批淫黄胶囊(批5份,分别按“2.4”项下方法制备供试品溶液,进样20 μl,按上述色谱条件测定,计算淫羊藿苷含量,结果rsd＝2.92%。 　　2.9 加样回收率试验 　　取已测定含量的淫黄胶囊(批内容物,研细,称取6份,各