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高效液相色谱法测定诃子中鞣花酸的含量的论文
作者：贝玉祥， 杨阳， 郭英， 李正全，高云涛
【摘要】 目的建立诃子提取物中鞣花酸含量的高效液相色谱(hplc)测定方法。方法色谱条件shim-pack clc-ods色谱柱(150 mm×6 mm，5 μm)，柱温30℃,用ch3oh-etoac-kh2po4/h3po4(0.05 mol/l)(体积比30∶2∶68)作为流动相,检测波长为254 nm。结果鞣花酸在0.268～5.36 μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。平均加样回收率为98.42%,rsd为1.13%(n=5)。结论该方法快速、简便、准确，可用于诃子中鞣花酸的含量测定。
【关键词】 诃子; 鞣花酸; 高效液相色谱
abstract：objectiveto develop an hplc method for the determination of ellagic acid in the extract of terminalia .methodshplc separation -pack clc-ods columm (150 mm×6 mm，5μm)obile phase consisted of methanol ethyl acetate, 0.05 mol/l kh2po4-h3po4(34∶2∶64) at a flol/min. the detection . resultsthe linear range l for ellagic acid. the average recovery ethod is rapid, accurate and reproducible for determination of ellagic acid in the extract of terminalia.
key inalia; ellagic acid; hplc
诃子terminalia chebula rotz.又名诃黎、诃黎勒、随风子，为使君子科植物的果实[1]。. 诃子作为中药在中医临床上广泛使用，用于油脂抗氧化方面的研究在国内已见有专门报道[2]。诃子果实中含丰富的鞣质和多元酚类，约为30%～40%[3]已有文献报道，鞣质和多元酚类具有较好的抗氧化性[4]。
鞣花酸(2，3，7，8-tetrahydroxy benzopyrano[5， 4，3-cde]benzopyran-5，10-dione) 是一种植物多酚类化合物[5](如图1)，为诃子中主要的活性成分之一，广泛存在于各种自然的软果、坚果等植物果实中。它对化学物质诱导癌变及其他多种癌变有明显的抑制作用，它能与人体内有害自由基结合，具有强力祛癌变功效，可以抗衰老、增加机体免疫， 还具有降压、镇静作用，对多种细菌、病毒有很好的抑制作用[6]。因此鞣花酸有“克癌之星”“致癌物清除剂”之美称。从机理上讲， 鞣花酸是一种抗氧化剂[7]，它可作为保健食品添加剂，研究、开发本品具有较高的经济价值和广泛的应用范围。
本实验建立了hplc法测定诃子中鞣花酸含量的方法，并对文献报道的多种色谱条件进行了比较[8～10]，表明本文方法精确可行。
1 仪器与试剂
日本岛津spd-10at高效液相色谱仪; spd-10avp检测器;sil-10ap自动进样器;超纯水器(arium 611uf，sartorius);超声波清洗器(as3120a，天津瑞森特);电子天平(adventurertm，ar2140，上海奥豪斯公司); 旋转蒸发仪(r-200，瑞士buchi)。岛津uv2100型，甲醇为色谱纯;实验用水为超纯水，蒸馏水自制，其它试剂均为国产分析纯试剂。
鞣花酸对照品(购自购自成都普瑞法科技开发有限公司),纯度≥98%。诃子(产自云南临仓和缅甸)。
图1 鞣花酸的结构
2 方法
2.1 色谱条件色谱柱为岛津shim-pack clc-ods柱(150 mm×6 mm，5 μm)， 柱温30℃，用ch3oh-etoac-kh2po4/h3po4(0.05 mol/l)(体积比34∶2∶64)作为流动相，检测波长为254 nm。
2.2 对照品溶液的制备精密称取鞣花酸对照品6.7 mg，加甲醇25 ml制成每毫升含0.268 mg的对照品溶液。
2.3 供试品溶液的制备精密称取诃子粉 (均过60目筛)约1 g，置于100 ml具塞三角烧瓶中，加60%乙醇25 ml，超声提取60 min，过滤，用60%洗涤滤渣，合并滤液和洗涤液， 50℃旋转蒸干，加甲醇定容至10 ml，以0.45 μm微孔滤膜滤过，滤液作为样品供试液，进样10 μl。
2.4 标准曲线制备精密吸取对照品溶液1.0，2.0，5.0，10
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